使用反相液相色谱几天，终于弄明白了几个问题。虽然我是学化学的，但是我觉得还是用我的语言来说更好些。

       大家都知道泥沙在激烈的流水中会被冲走，这些泥沙颗粒大小和重量都不一样。在一定的水流下，质量大的泥沙运动的缓慢，而细小的沙粒则可以较快的移动。这样，在他们的慢慢移动过程中，质量大运动慢的和质量小运动快的就会鲜明的分别出来。液相色谱差不多也是利用了类似的原理。泥沙可以理解成样品，流水则可以理解成流动相。这个过程可以理解为分离。当然，事实更复杂。这样理解只是为了更好的理解操作。

       高效液相色谱分析就是先分离再检测的过程。它有高压泵，色谱柱，检测器构成。高压泵就是提供“水流”的设备。色谱柱就是“泥沙”分离的“河床”，如果“泥沙”在流出“河床”以后还没有被分离，那么分析就无法进行下去了。检测器，就是对分离出来的物质进行检测。这样，看看我们有几个可以控制的参数。泵控制这里，我们可以设置流速，检测器上可以控制检测波长（紫外检测器），还有就是流动相的组分。

       进行液相色谱测定，首先要解决一个能不能测定的问题。对于反相高效液相色谱来说，分子量是一个衡量的标准。分子量低于2000的，都可以采用液相色谱法。其次，被测物质要溶于流动相，并且在流动相和固定相间分配时存在差异。一般我们测量的物质经过处理以后，都会达到这个要求。

       选择合适的流动相，开始测定。先看出峰时间，出峰时间不要太久，可以考虑改变流动相的极性来缩短出峰时间。然后看全部峰出完，峰与峰之间的距离是不是合适，可能有的峰会发生重叠或者错位，可以添加流动相的离子强度或者调节ph值。如果还不能解决可以考虑使用多元流动相。当峰与峰的分离满足我们测定的时候，就可以宣布收工了。

      使用液相色谱还有一个配流动相的常规方案。一般的分离，简单使用甲醇和水做流动相就可以，再难分离的可加入缓冲溶剂或者离子溶剂，{zh1}如果你分析的物质很顽固，这时候就要配置三元流动相，比如使用乙腈、甲醇和水并加入缓冲溶液。

      综上，虽然我们能调整色谱仪器的很多参数，但是配置流动相才是色谱分析的关键。只有分析方案合理，才有成功的可能。写的不好，我想以后我会进步的。欢迎大家批评，共同提高。