串联质谱定量时,是以后面产生的碎片峰(子离子)定量,但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎片,所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多.
建立方法的步骤是:用一定溶度的标准品溶液(1-10 ug/mL)Tune化合物的一级质谱条件,找到母离子的{zj0}质谱条件,然后对母离子进行打碎,优化碰撞能量,得到其特征性的子离子.{zh1}利用该质谱条件和该母离子->子离子对进行定量.
API和ABI如何区别
但API也是Atmosphere Pressure Ionization (大气压电离,包括ESI,APCI和{zx1}的大气压光电离APPI)的简称,API是LCMS的关键,因为这一技术最开始是ABI公司发明的,所以ABI的LCMS和LCMSMS都以API命名,常见的型号有API2000,API3000,API4000.您问的API也可能是指这个.
Q-Tof中的Q是什么意思
Q就是指的四极杆,TOF是指的飞行时间.QQQ是三重四极杆.两者是四极杆-飞行时间的串联一般的四极杆串联都是三重四极杆的空间串联,至于纯粹的二重四极杆没有听说过,但是QQ-TOF有没有就不是很清楚
质量偏差怎么办
不知道你用的是哪个厂家的仪器,应该每个厂家都会随机带有校正液.
质谱的质量数偏了,说明你的仪器该校正了,一般3个月就要校一次机.
做样前-检查氮气,流动相,质谱仪的真空度,毛细管温度,…
1 {zh0}不用直接进样(容易污染离子源)!
2 做联用时{zh0}分流(a可以使用常规柱,b缩短分析时间,c 延长质量分析器寿命)
3 {zh0}使用在线切换阀,降前每个样品的前后1-2分钟的流动相切入废液(避免样品中的盐进入质 谱,做Sequence时可以把平衡柱子的流动相切入废液)
4 开始联用前,直接运行质谱数分钟,可以先将温度(毛细管温度和离子源温度(APCI))加热到预设定值(如果是APCI源还可以避免将烧掉heater,很贵的,我烧掉过一个)
5 待机时将切换阀置于waste,避免刚开液相时将流动相打入离子源,
6 关机前毛细管的温度先降下来,稳定一段时间后再关闭电源,避免风扇停止转动后毛细
管外围的热量向里扩散,容易引起内部线路及电子元器件老化加速,
7 每天清理毛细管口外部,擦洗干净,每次停机时注意清洗Skimmer,用无尘擦拭纸,kimberly
那种,
8 如果用的是钢瓶而且天天做样的话,将两个钢瓶并联,当然,一月不做一次的话就算了,
9 做定量时注意离子源喷针的具体位置,否则标准曲线就不能用了,
10 不要不经过柱子分离进行定量分析,结果不可靠(竞争性抑制目标分子离子化)
11 如果是负离子检测的话,可以相流动相中加入少量异丙醇,
12 不好使用不挥发性盐,可以使用挥发性盐,但浓度不要超过20mmol/l
13 需要使用酸的情况下可以用甲酸,乙酸,三氟乙酸可以用,但能用甲酸或乙酸时就别用TFA
CID和CAD区别
CID 英文是 collision-induced dissociation 碰撞诱导解离.通常在真空接口处调节电压发生CID现象,一般是去除溶剂,如果电压增大,也会产生碎片离子.这是一级质谱的原理.CAD collision-activated dissociation 碰撞活化解离. 做二级质谱时,应该是发生在Q2处吧,选择的母离子的进入Q2后 碰撞活化产生子离子,这个过程称为 CAD.
我们用的API3200,CID指的是Q0里面的诱导碰撞的气体,CAD指的是Q3里面的诱导碰撞气体,也就是说,API里的CID&CAD都是指氮气.
氮气发生器该使用吗
氮气发生器的工作原理是分离空气,电解膜的负极侧发生氧化反应,吃掉空气中的氧化性气体,在正极侧还原,空气流过电解池后就只剩下氮气和惰性气体,故国内发生器的纯度大多标有"相对含氧量",氮气的纯度和空气流速,有效分解面的长度,电解电势的强弱都有关系,这种分离方法也决定了氮气的纯度不可能做的很高. 加入电解质的作用就是提高水的导电率,使电化学反应能顺利进行.发生器对色谱的影响有一点常常被忽略,就是发生器内的开关电源工作事会对电网电压造成一定的干扰(压缩机的启动和停止也会),所以色谱仪必须经过稳压电源供电,当然不用稳压电源的用户极少,但还是有,我遇见过.
APCI和ESI的不同点
离子产生的方式
1.APCI利用电晕放电离子化,气相离子化.
2.ESI利用离子蒸发,液相离子化.
能被分析的化合物类型不同
1.APCI 弱极性,小分子化合物,且具有一定的挥发性
2.ESI 极性化合物和生物大分子.
流速
1.ESI 0.001到0.25 ml/min.
2.APCI 0.2到2 ml/min.
多电荷
1.APCI不能生成一系列多电荷离子,所以不适合分析大分子.
2.ESI 能生成一系列多电荷离子,特别适用于蛋白,多肽类等生
物分子.
气质和液质的检测器没有什么不同,都是四极杆和离子阱
气相和液相的差别有流动相,仪器结构,检测器,样品气化难易等.气质和液质除了采用的分离手段不同(气相和液相)外,就其质量检测器而言,差别在哪里
主要的区别在于真空系统和电离方式.气质的真空系统比较简单,只要一个小的机械泵和一个分子涡轮泵就可以了.液质的机械泵要比气质大,需要两个分子涡轮泵.气质的电离方式有电子电离(EI)和化学电离(CI).液质的电离方式有电喷雾电离(ESI),大气压化学电离(APCI)和大气压光电离(APPI)
现在液质的应用更广,样品处理不用衍生化,我是搞药的,主要用的液质.农残和兴奋剂检测似乎还是气质应用更多.
等度还是梯度如何选
其实如果作新药和西药只做一两个化合物,是等度洗脱好,速度快,但也并非越快越好,特别在分析生物样品时,考虑到基质效应,保留因子控制在2-3左右{zh0}!
梯度洗脱适合分析多个结构不同的样品及化合物与代谢产物一同鉴定的时候,比如苷和苷元的一同测定,另外很多做合成化学的分析实验室用的也是一通用的梯度洗脱方法,一个方法搞定大部分样品.一般来说对于组成简单的样品可以采用等度洗脱,而对于那些复杂的样品分离通常需要进行梯度洗脱.
质谱没有信号原因
质谱没信号要顺藤摸瓜地找原因.一般先从离子源找起,然后看离子传输通道,再到质量分析器,接下来是离子探测器数据采集卡和软件.一般情况下不会有什么大问题.你检查一下各路的连线是否良好接触.skimmer的中文一般翻译成漏勺,它的主要作用是阁开两个不同真空度的空间,同时让离子通过.
如何更换机械泵油
一般的,3个月到半年更换一次泵油,同时停机对仪器进行一次清洗.
更换泵油的时候,先开启振气阀5-10分钟,待将泵内沉淀振起后,关闭振气阀,同时关闭电源.打开泵下的泵油排放阀门,放掉旧油.
如果,泵油已经很脏,则可取少许新油清洗泵后,放掉……
我一般3个月更换一次泵油,毕竟油比泵要便宜多了
北京四方特种油品厂出产的高速真空泵油有比较好的口碑,价格合理.
质谱不出峰的故障排除
如果在检测样品什么峰都看不到,可从以下几方面考虑:
1 进样系统与离子源没连接或有漏液;
2 六通阀漏液
3 雾化气没开
4 喷雾电压没有
5 离子进入分析器的离子通道堵塞
6 喷雾毛细管堵塞
如何根据样品选择离子源
看分子量的大小,极性
APCI适合小分子,极性小的化合物
ESI适合分析的分子量范围较大,分子要求带有一定极性.
一般都用ESI分析,如果极性实在太小,才想到用APCI
怎么测仪器的灵敏度
检验仪器灵敏度的方法一般都是用利血平,
通过定量环直接进样,看信噪比
产生碰装室离子交互影响(Collision Cell Cross Talk)的原因及xx
多通道扫描(MRM)时,如果两个离子扫描通道的碎片离子一样(或类似,相差1-2分子量单位),前一个离子通道扫描结束后,碰装室里的离子来不及xx,影响下一个离子通道反应的定量(如果色谱分离xx则无此影响).
xx:
1, 选择特异的子离子(特别是在用稳定同位素内标时)
2, 增加离子通道扫描反应之间的时间间隔(100 ms→300 ms)
3, 可设置额外的"无用的离子扫描通道(dummy MRM)"
