用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量,为什么有时和凝胶层析法 ...
两种方法原理不同,有差异是正常的。如果差距较大,要仔细分析。
一般凝胶层析是非变性的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的,二硫键也被还原,所以是亚基(肽链)分子量。
凝胶层析与分子形状有关,一般marker都是球状蛋白,所以测球状蛋白分子量较准。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与分子形状无关。
有些蛋白性质特殊,不适于用SDS-凝胶电泳法测定。比如结构特殊的,如胶原;带很多电荷的,如组蛋白;带有较大辅基的,如糖蛋白。
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