HBV是乙型肝炎的病原体，乙型肝炎患者潜伏期、急性期及乙型肝炎病毒携带者的血液具有高传染性，接触极微量的（10-7～10-6ml）的血液即可引起感染。乙型肝炎危害极大，约10%的乙型肝炎转变为慢性肝炎（CH），部分慢性活动性肝炎（CAH）转变为肝癌（HCC）。婴幼儿感染HBV易形成持续病毒携带者，HBV病毒携带者发生原发性肝癌的危险性更大。而我国又是乙型肝炎高感染国家，据统计，全国人口10%以上为HBsAg携带者，乙型肝炎病毒的总感染率为35.5%～61.1%。由于可进行定量分析，对xx疗效和病情监测都具有重要意义。本实验用三种不同的方法检测了HBV-M，旨在探讨三种方法在日常生活工作中的可行性与相关性。现将实验结果报告如下。
        1 材料与方法
        1.1 材料
        1.1.1 健康人血清 采用TRFIA、MEIA、ELISA对200例健康职工经HBV-M五项指标做定性（量）分析，随机抽取50例作为正常对照，年龄1～45岁。
        1.1.2 乙型肝炎患者血清 用TRFIA、MEIA、ELISA对50例强阳性或临界值血清样本做HBV-M五项指标检测，年龄1/12岁～81岁。 
        1.1.3 质控血清 卫生部临检中心质量控制血清浓度分别为：0.2ng/ml，0.5ng/ml，1.0ng/ml，2.0ng/ml,5.0ng/ml；内蒙古临检中心质控血清：0.3ng/ml,1.0ng/ml,2.0ng/ml，5.0ng/ml。
        1.2 诊断试剂、仪器与方法
        1.2.1 诊断试剂与仪器 TRFIA分析法使用上海新波生物技术有限公司生产的ANYTEST2000型时间分辨荧光免疫检测系统和SYM-BIO BGATE2310全自动微孔洗涤机及配套试剂。MEIA分析法使用美国Abbott试剂和AXSYM 全自动酶免发光分析系统；ELISA法使用北京万泰药业公司及3V公司生产的试剂。洗板机为天石医疗用品制作所ZMX-998B型自动酶标洗板机；酶标仪为奥地利CliniBio 128C自动酶标仪和SHANDONG GAOMI CAIHONG ANALYTICAL INSTRUMENTS CO.LTD的GF-M2000 MICROPLATE READER。
        1.2.2 方法 TRFIA（Time resolved fluoroimmuno assay，时间分辨荧光免疫技术）技术是以镧系元素铕化合物作为荧光标记物，利用这一荧光物质有长荧光寿命的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光xx衰退后再进行测定，所得信号xx为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效地xx非特异本底荧光的干扰，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。 
        2 结果与分析
        2.1 TRFIA和ELISA检测定性结果分布得出
        HBsAg：灵敏度48/（48+1）×{bfb}=97.96%，特异性50/（50+1）×{bfb}=98.04%，诊断符合率98.00%；同理：HBsAb：灵敏度为93.47%，特异性81.48%，诊断符合率97.00%；HBeAg：灵敏度为96.55%，特异性97.18%，诊断符合率97.00%；HBeAb：灵敏度为90.91%，特异性89.74%，诊断符合率90.00%；HBcAb：灵敏度为95.92%，特异性92.16%,诊断符合率94.00%。
        2.2 TRFIA和MEIA检测定性结果分布TRFIA和MEIA检测定性结果分布得出
        HBsAg灵敏度48/（48+1）×{bfb}=97.95%；特异性51/（51+1）×{bfb}=98.08%；诊断符合率98%；同理：HBsAb： 灵敏度为{bfb}，特异性85.45%，诊断符合率92%；HBeAg：灵敏度为96.97%，特异性98.57%，诊断符合率98.00%；HBeAb：灵敏度为95.83%，特异性93.42%，诊断符合率94.00%；HBcAb：灵敏度为98.00%，特异性96.00%，诊断符合率97.00%。
        2.3 ELISA和MEIA检测定性结果分布ELISA和MEIA检测定性结果分布得出
        HBsAg： 灵敏度49/（49+0）×{bfb}={bfb}；特异性51/（51+0）×{bfb}={bfb}；诊断符合率99.00%；同理：HBsAb： 灵敏度为{bfb}，特异性98.18%，诊断符合率99.00%；HBeAg：灵敏度为96.67%，特异性98.57%，诊断符合率98.00%；HBeAb：灵敏度为91.67%，特异性{bfb}，诊断符合率98.00%；HBcAb：灵敏度为98.00%，特异性{bfb}，诊断符合率99.00%。
        2.4 分析比较
        2.4.1 当CUTOFF值设置为≥0.3ng/ml时，HBsAg：TRFIA 1例阳性，表现为“小三阳”，而ELISA阴性，其浓度为0.4ng/ml，结果仅为HBeAb和HBcAb阳性，提示TRFIA由于相对敏感而检出，而MEIA与TRFIA基本一致。但就临界标本而言，TRFIA、ELISA、MEIA均存在一定的假阳性率、假阴性率分别为1.96%、2.04%。就随机样本而言，ELISA、MEIA则HBsAg 较易出假阳性、假阴性反应。实际工作中HBsAg的CUTOFF值设为0.5ng/ml。
        2.4.2 当CUTOFF值设置为≥0.03NCU/ml时，TRFIA 法HBeAg2例阳性，而ELISA阴性，经过综合分析，这2例为真阳性。而MEIA仅有1例阳性，说明三种方法均有一定的漏检TRFIA法测HBeAg灵敏度、特异性、结果符合率就随机样本而言，要高于ELISA、MEIA。因本项目标本所选取大多为强阳性标本，故其灵敏度、特异性、结果符合率基本一致。
        2.4.3 当CUTOFF值设置为≥10mIU/ml时，HBsAb三种方法均很好，阳性符合率都很高；当CUTOFF值设置为≥1.5NCU/ml时，HBeAb三种方法阳性率也都很高。但就临界标本而言，ELISA和MEIA出现假阳性和假阴性反应要高于TRFIA法且易漏检。
        2.4.4 当CUTOFF值设置为≥0.095NCU/ml时，HBcAb：TRFIA 1例假阳性，ELISA1例假阴性，三者符合率很高。这样（血清标本分别进行20倍、30倍稀释）检测结果基本符合HBV感染后的血清学标志物模式。
        2.4.5 三种方法阴阳结果经配对资料的卡方检验，差异均无显著性（P＞0.05）。就随机样本而言，三种方法结果符合率都很高，就临界值样本，ELISA和MEIA假阴性、假阳性反应明显高于TRFIA法；灵敏度和特异性普遍低于TRFIA法。究其原因，可能与前两种方法与TRFIA法反应原理不同有密切关系。 
        3 应用
        3.1 TRFIA定量检测HBV-M（俗称乙型肝炎两对半）临床应用及意义 血清乙型肝炎五项标志物定性测定始于80年代中期,对乙型肝炎的疾病诊断,病程监测,疗效观察起到了一定的作用。随着临床医学的迅速发展,定性检测已远远不能满足临床及患者的要求。由于受检测抗原抗体“定性”结果不是“阴性”就是“阳性”,只能作程序式的、机械的判断,对某些结果不能做出合理的解释且存在较大缺陷,无法动态观察病情和疗效变化,为临床所提供的信息有限。随着临床医学检验中新型标记方法的建立(如用镧系元素的原子作为标记物的时间分辨荧光分析技术 ),乙型肝炎五项病毒指标定量测定成为可能，大大弥补了酶标（ELISA）定性测定的不足之处。
        3.1.1 TRFIA检测HBsAg灵敏度可达0.0625ng/ml（至少0.2ng/ml），而ELISA检测HBsAg灵敏度是0.5ng/ml（甚至达        2ng/ml），也即只有血清中HBsAg的达到0.5ng/ml酶标才会呈阳性。而两对半定量五项指标TRFIA的综合应用较以往定性检查更加灵敏准确。
        3.1.2 动态观察疗效和病情监测 病情的发生、发展、疗效、预后是一个动态变化的过程，定量检测HBV-M各项标志物的浓度变化可对乙型肝炎的病程、xx、预后能起到一个全程动态检测的作用，能够为医生对病情疗效做出合理的解释提供依据，指导xx。  本文由网提供，请在转载引用时保留，谢谢您的合作！