交泰丸对与下丘脑—垂体—肾上腺轴相关的细胞因子的影响探讨- 医学论文 ...
交泰丸对与下丘脑—垂体—肾上腺轴相关的细胞因子的影响探讨 [原创 2010-04-06 10:16:43]   

【关键词】  交泰丸/药理学; xx/中药疗法; 细胞因子/血液; 疾病模型,动物; 大鼠 
交泰丸,出自明代《韩氏医通》,由黄连、肉桂两味xx以特殊的配伍比例(质量比为10∶1)组成,具有交通心肾、xx之功效,主要用于xx心肾不交引起的惊悸、夜寐不安等症,临床疗效确切[1-2]。本研究观察了交泰丸对与下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴相关的细胞因子的影响。 
    1  材料与方法 
    1.1  xx  黄连和肉桂均购自广州中医药大学{dy}附属医院,经广州中医药大学中药学院中药鉴定教研室鉴定为xx;对氯苯丙胺酸(PCPA)为美国Sigma公司产品。 
    1.2  动物  健康清洁级雄性SD大鼠50只,体质量180~200g,从广东省医学实验动物中心购进,合格证号:2006A015。每只大鼠均在相同条件下自由饮水,摄食,保持自然光照。 
    1.3  试剂  白细胞介素1(IL1)试剂盒(批号:24985001)为B&M公司产品;肿瘤坏死因子α(TNFα)试剂盒(批号:20061120)为晶美公司产品。 
    1.4  主要仪器  CR22G高速冷冻离心机(日本日立);RT2100C酶标分析仪(广州览众医疗设备有限公司);GSX500BSⅡ型隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂);AUW120D型分析天平(日本岛津);各种规格移液枪(广州实技科学仪器有限公司)。 
    1.5  分组  按照随机原则,利用随机数字表法将大鼠分为5组:正常对照组、模型组、泻心组(单用黄连15g)、xx组(单用肉桂1.5g)、交通心肾组(黄连、肉桂质量比为15g∶1.5g),每组10只。 
    1.6  造模[3]  除正常对照组外,其他各组均一次性腹腔注射PCPA300mg/kg,30h后观察大鼠行为,复制大鼠xxxx模型。 
    1.7  给药  造模成功后,正常对照组与模型组分别用生理盐水灌胃(2.5g·kg-1·d-1),其他各组以不同比例配伍的药液分别灌胃(2.5g·kg-1·d-1),每天1次,连续7d。 
    1.8  样品采集与处理  实验各组{zh1}一次给药24h后,用100g/L水合氯醛腹腔注射(2.3mL/kg)xx后,腹腔静脉取血3mL,静置1h,4℃过夜,1 500r/min离心30min,取上清液,大鼠血清中IL1、TNFα 含量采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测,均严格按照试剂盒操作。 
    1.9  统计学方法  采用SPSS 11.0统计软件进行统计分析。 
    2  结果 
    2.1  一般情况  大鼠在PCPA腹腔注射30h后出现烦躁不安,白天也活动不停,不能正常睡眠,昼夜节律基本被破坏,出现xxxx状态,说明xx模型复制成功。各用药组连续给药7d后,模型组大鼠xx状态无明显改善,泻心组大鼠xx有一定好转,xx组大鼠xx有加重的趋势,交通心肾组大鼠xx明显减轻。 
    2.2  各组大鼠血清IL1、TNFα含量比较表1结果显示,模型组IL1、TNFα水平显著性降低(P<0.05或P<0.01);交通心肾组IL1、TNFα水平显著性升高(P<0.05);泻心组IL1、TNFα水平有一定程度升高,xx组以上2指标水平低于模型组,但与模型组比较均无显著性差异(P>0.05)。 表1  各组大鼠血清IL1、TNFα含量比较统计方法:方差分析;①P<0.05,②P<0.01,与正常对照组比较;③P<0.05,与模型组比较
3  讨论 
    中医认为人的睡眠是营卫之气正常循行,阴阳之气规律转化的结果,这种规律性遭到破坏,则人体就表现出睡眠障碍。现代医学认为睡眠分为浅睡眠和深睡眠,分别称慢波睡眠(SWS)和快眼动睡(REM)。库完善[4]研究提出,HPA轴的功能与睡眠状态密切相关,夜间睡眠早期SWS占优势,HPA轴分泌活动受抑制,睡眠后期则REM占优势,HPA轴分泌呈活跃状态。通过调节HPA轴可以xxxx状态,维持各睡眠成分的正常比例。HPA轴的相关调节因子不仅参与对HPA轴的调节,同时也直接参与了对睡眠的调节。 
    细胞因子不但是重要的免疫调节因子,而且具有广泛的中枢调节作用,它们不仅在外周血液单核细胞中释放并存在,而且外周神经和大脑中也存在,因此细胞因子能通过不同线路影响xxxx系统的睡眠过程[5]。IL1是一种睡眠因子,研究表明[6-7],睡眠剥夺(SD)时IL1以及其他促睡眠物质在体内的蓄积标志着睡眠的积累,这些物质给机体以睡眠压力,从而形成SD后的睡眠“反跳”现象,以补偿所失去的睡眠。TNF在免疫系统影响睡眠过程中起到中介的作用,可通过提高脑内5羟色胺(5HT)的更新率,增强5HT能神经元的功能,延长动物的慢波睡眠时间。 
    本实验通过腹腔注射对氯苯丙胺酸复制大鼠xx状态。xx模型大鼠血清中IL1、TNFα含量均下降,与正常对照组比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);泻心组大鼠IL1、TNFα含量有所升高,xx组大鼠IL1、TNFα含量降低,甚至低于模型组,但与模型组比较无显著性差异(P>0.05);交通心肾组大鼠IL1、TNF α含量升高,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。 
    交泰丸由黄连、肉桂按10∶1的比例配伍而成,方中黄连大苦大寒,清泄亢盛之心火,使心阴免受煎灼,得以下润于肾;肉桂辛甘大热,助阳补炎,引火归源,能助肾中阳气、益命门之火,蒸肾中之阴得以化而上奉心阳。有研究表明,交泰丸中大剂量苦寒的黄连对HPA轴具有抑制作用[8],故泻心组大鼠IL1、TNFα含量升高,所以大鼠xx有所减轻;小剂量辛温的肉桂对HPA轴具有兴奋的作用[8],故xx组大鼠IL1、TNFα含量降低,大鼠xx状态不但没有减轻,反而有所加重;交通心肾组通过黄连与肉桂按10∶1比例配伍后,IL1、TNFα含量均升高,因为黄连用量显著大于肉桂用量,IL1、TNFα含量虽有升高,但由于肉桂的抑制作用不会升高太过,说明交泰丸通过大剂量寒凉药与小剂量辛温药的配伍后,能有效调节HPA轴反馈与负反馈的动态过程,从而发挥交通心肾xxxx的作用。

 

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