1.3.2  精密度实验

　　取同一份样品液，连续进样5次，3个色谱峰保留时间RSD分别为0.15%，0.23%，0.18%，峰面积RSD分别为0.35%，0.33%，0.38%。

　　1.3.3  稳定性实验 

　　取同一份样品液，每隔4 h进样1次，共测定5次，3个色谱峰保留时间RSD分别为1.12%，1.36%，1.28%，峰面积RSD分别为1.54%，1.13%，1.27%。

　　1.3.4  重复性实验 

　　将山茱萸和五味子单煎液按4:2合并，得到5份单煎合并液。分别按上法进样分析，3个色谱峰保留时间RSD分别为1.09%，1.15%，0.97%,峰面积RSD分别为2.58%，2.80%，2.61%。

　　1.3.5  加样回收率实验 

　　精密称定样品适量，5份，分别加入一定量的马钱苷、没食子酸和五味子醇甲标准品，按样品分析方法进行处理，并各平行测定2次。本方法3种成分的平均加样回收率分别为100.58%，99.97%，100.14%，RSD分别为2.48%，2.63%，2.37%。

　　2  结果

　　按照“1.2”项下方法操作，进样10 μl，测定山茱萸与五味子不同配伍比例各样品中的马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量，结果见表1。从表1中可知，五味子中不含有马钱苷和没食子酸组分，该两种组分的测定结果数据均来源于山茱萸中成分；山茱萸中不含有五味子醇甲组分，测定结果数据均来源于五味子中成分。山茱萸五味子配伍时这3种组分的百分含量和配伍比例之间的关系见柱状图2。表1  各样品中马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量（略）

　　从表1和图2可以看出，比较马钱苷含量数据，随着五味子配伍比例的增大，马钱苷的溶出呈下降趋势。在配伍比例较低（≤4:4）时，合煎液中马钱苷的溶出较山茱萸单煎液要多，且变化不大，在配伍比例较高时，马钱苷的含量迅速下降了23%。合煎液中没食子酸组分的百分含量随着五味子配伍比例的增大呈线性减小，且均低于山茱萸单煎液。数据波动范围较其它两组分小。五味子醇甲的含量变化趋势与没食子酸相似，但下降率更大。按配伍比例 4∶2 配制的山茱萸五味子单煎合并液中这3种组分的含量均高于同比例合煎液。

　　上述结果分析均表明山茱萸五味子配伍对各有效组分的溶出均有较大影响。在配伍比例（≤4∶4）时，五味子对山茱萸中马钱苷的含量有促进作用。各配伍比例时五味子抑制了山茱萸中没食子酸组分的溶出，山茱萸同样在各配伍比例下抑制了五味子中五味子醇甲组分的溶出。采用先对单味药材进行煎煮，然后对单煎液进行配伍的思路可以xx药材共煎过程中山茱萸组分和五味子组分之间的相互作用，这说明山茱萸五味子配伍对组分的影响主要在煎煮过程中进行。在实验过程中，未发现合煎液或者单煎合并液出现沉淀，那么组分含量变化的原因可能是，山茱萸五味子同属酸味药，有机酸和木脂素部分组分存在溶出竞争，溶出被抑制，或者部分形成新的化合物而减少了组分的含量。

　　3  讨论

　　在分析方法上对流动相的组成及洗脱方式分别进行了考察优化。可以采用梯度洗脱同时得到3种组分的色谱峰，但样品液分离效果较差，峰形也较差。并且从含量测定精度角度考虑，最终选择了两次等度洗脱，得到3种组分的良好分离和快速测定。

　　对山茱萸水煎液和五味子水煎液配伍时主要组分含量变化进行了研究。结果表明，在配伍比例较低（≤4∶4）时，合煎液中马钱苷的溶出较山茱萸单煎液要多，且变化不大，在配伍比例较高时，马钱苷的含量迅速下降。合煎液中没食子酸、五味子醇甲组分的百分含量随着五味子配伍比例的增大呈线性减小，且均低于山茱萸单煎液。按配伍比例 4∶2 配制的山茱萸五味子单煎合并液中这3种组分的含量均高于同比例合煎液。

　　采用先对单味药材进行煎煮，然后对单煎液进行配伍，所得数据与同比例合煎液比较，可知山茱萸五味子配伍对组分含量的影响主要在煎煮过程中进行。