1原理

本法是利用含有自由醛基的还原糖，在碱性溶液中，能将二价铜还原成氧化亚铜的性质进行测定。

2仪器

下端弯曲与管身成直角的滴定管。

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3试剂

（1） 0.1N 硫代硫酸钠标准溶液

配制：溶26克硫代硫酸钠及0.2克无水碳酸钠于1000ml水中。缓和煮沸10min，冷却。将溶液保存于棕色具塞瓶中，放置一周后过滤备用。

标定： 称取于120℃烘至恒重的重铬酸钾0.2克，称准至0.0002克，置于500ml具塞锥形瓶中，溶于25ml煮沸并冷却的水中，加2克碘化钾及20ml 4N的硫酸。待碘化钾溶解后，于暗处放置10min，加250ml水，用 0.1 N硫代硫酸钠溶液滴定，近终点时加3ml 0.5%淀粉指示剂，继续滴定至溶液由蓝色转变成亮蓝绿色。同时作空白试验校正结果。硫代硫酸钠标准溶液当量浓度N按下式计算：

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N= G/0.04903V

式中： G—— 重铬酸钾的重量（克）

V—— 硫代硫酸钠溶液的用量（ml）

0.04903—— 每毫克当量重铬酸钾的克数

（2） 4N的硫酸溶液

边搅拌边将56ml的浓硫酸小心地加入到约350ml蒸馏水中，并定容至500ml。

（3） 0.5%淀粉溶液

1.25g可溶性淀粉，加少量水调成糊状，在不断搅拌下注入200ml沸水中，微沸2min，冷却，加水稀释成250ml。

（4）30%醋酸溶液

取29.8ml无水乙酸，用水定容至100ml.

（5） 斐林溶液

A. 硫酸铜溶液   溶34.639克硫酸铜于水中，稀释至500.0ml。

B. 碱性酒石酸盐溶液   溶173克酒石酸钾钠，50克氢氧化钠溶于水中，稀释至500.0ml。

4标定：

取10.00ml斐林溶液的A液，加4ml30%醋酸溶液和3g碘化钾，加25ml煮沸后冷却的水，使碘化钾溶解，以0.1N 硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液呈微黄色，加硫氰酸铵2g，0.5%淀粉溶液3ml，搅拌后，继续滴定至蓝色消失。斐林溶液的校正系数f计算如下：

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式中： V——0.1N 硫代硫酸钠标准溶液的用量（ml）

0.006355—— 每毫升0.1N 硫代硫酸钠溶液相当的铜的克数

0.01748—— 每毫升斐林溶液的A液中含有的铜的克数

（6）次甲基蓝指示液，1%

   1g次甲基蓝溶于100ml水中。

5操作步骤

（1）取糖化试验的麦芽汁，稀释至20倍或更合适的倍数，使其滴定量在15～50ml之间。

（2） 预备实验  取斐林溶液A、B各5.0ml，置锥形瓶中，加10ml水稀释，加热使其于5min内沸腾，在沸腾状态下用滴定管滴入稀释麦芽汁至蓝色即将消失时，加1～2滴次甲基蓝指示液，继续滴定至蓝色消失，记录所用稀释麦芽汁的数量。

（3） 正式测定  在200ml锥形瓶中加入斐林溶液A、B各5.0ml，再加少于预备实验所用1ml的麦芽汁，加热至沸后，加1～2滴次甲基蓝指示液，用稀释麦芽汁滴至终点，记录用去稀释麦芽汁的总量。

6计算

根据稀释麦芽汁在正式测定中的用量，查表得相应麦芽糖量，再用下式计算：

总还原糖（麦芽糖，g/ml麦汁）＝f×n

或

总还原糖（麦芽糖，g/100g浸出物）＝

式中：  f——斐林溶液系数

        n—— 稀释倍数

        G—— 麦芽汁中浸出物含量（%）

        D——麦芽汁20℃比重

注意事项：

（1） 本测定的操作条件必须严格控制，加热时间、滴定速度每次测定都必须一致，由沸腾至滴定完毕必须在3min内结束，否则应重做。（2） 用硫代硫酸钠标准溶液标定斐林溶液，标准溶液的浓度应正好0.1000N，否则计算时应把用量换算成相当于0.1000N的用量。

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