■生物柴油的生物酶合成法
　　为解决上述问题，人们开始研究用生物酶法合成生物柴油，即用动物油脂和低碳醇通过脂肪酶进行转酯化反应，制备相应的脂肪酸甲酯及乙酯。酶法合成生物柴油具有条件温和、醇用量小、无污染排放的优点。2001年日本采用固定化Rhizopus oryzae细胞生产生物柴油，转化率在80％左右，微生物细胞可连续使用430小时。 　　2005年6月4日，《中国环境报》报道：清华大学生物酶法制生物柴油中试成功，采用新工艺在中试装置上生物柴油产率达90％以上。中试产品技术指标符合美国及德国的生物柴油标准，并满足我国0号优等柴油标准。中试产品经发动机台架对比试验表明，与市售石化柴油相比，采用含20％生物柴油的混配柴油作燃料，发动机排放尾气中一氧化碳、碳氢化合物、烟度等主要有毒成分的浓度显著下降，发动机动力特性等基本不变。 　　由于利用物酶法合成生物柴油具有反应条件温和、醇用量小、无污染物排放等优点，具有环境友好性，因而日益受到人们的重视。但利用生物酶法制备生物柴油目前存在着一些亟待解决的问题：脂肪酶对长链脂肪醇的酯化或转酯化有效，而对短链脂肪醇(如甲醇或乙醇等)转化率低，一般仅为40%-60%；甲醇和乙醇对酶有一定的毒性，容易使酶失活；副产物甘油和水难以回收，不但对产物形成一致，而且甘油也对酶有毒性；短链脂肪醇和甘油的存在都影响酶的反应活性及稳定性，使固化酶的使用寿命大大缩短。这些问题是生物酶法工业化生产生物柴油的主要瓶颈。 　　酶法生产生物柴油主要技术经济指标有： 1、采用固定床式酶反应器，以植物油及废油等为原料生产生物柴油，转化率均可达到95%以上，{zg}转化率可以达到96％。 　　2、建立了生物柴油精馏装置，分离精制收率高于86％，分离后产品中甲酯含量大于97%，分离后产品各项指标xx符合德国生物柴油生产标准(DIN5160697)。 　　3、建立了年产500t的生物柴油中试生产装置。反应器内固定化酶使用寿命超过20天。 　　4、以地沟油为原料生产生物柴油，成本约为3058元／t，以普通菜籽油为原料生产生物烧油，成本约为4300元／t。 　　5、燃烧性能明显优于0号柴油。在0号柴油中添加20％生物柴油的燃烧试验表明，燃烧尾气中有毒物质的排放降低35％以上。

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