现代生物实验室中一般来讲有 2大最危险的试剂,一是放射性同位素,像 P-32, S-35, H-3, CH-14之类的, 5-10年前的 90%的实验,像 DNA测序, DNA, RNA杂交实验,细胞蹭生分化实验,蛋白印迹实验等等都用放射性同位素来做,很多学生,特别是博士,博后们吃了很多射线的,同位素的特点是费用昂贵,主要是实验室废物出理费昂贵,另外实验敏感度也低,实验过程中对科研人员有辐射危害!感谢钱永健教授( Roger Yonchien Tsien)和其他几位发明了莹光素的诺奖教授们,让莹光素走进了绝大多数实验室,莹光素几乎全面替代了同位素,现在几乎所有的实验 Array, FACS, Q-PCR和 2代测序,细胞成像分析,彩色多抗体 Western-Blot分析等等实验都用了莹光素。
不过尽管生命科学的实验设备和平台在 21世纪的{dy}个 10年发生了xxxx的变化,很多领域都有了革命性的变化,但是现代生物实验室中最常用最有毒性的试剂溴化乙淀( Ethidium Bromide)却一直没有改变,从 1950年开始用到了今天,想信至今还是绝大多数实验室的必备品。溴化乙淀的主要作用是分析 DNA,其分子可插入 DNA的碱基之间,形成一种络合物,在 302nm紫外光透射仪激发并射出橙红色信号,可以用来显示琼脂糖和聚丙稀酰胺凝胶中的 DNA片断。
但是溴化乙淀是一种很剧烈的化学致癌剂,能够诱导 DNA碱基突变和破坏细胞线粒体的功能,一般实验室使用的剂量虽然很低 (0.25-1.0ug/ml), 但是给实验室工作品人员带来了很xxx烦,使用时必须要戴手套,含有溴化乙淀的琼脂糖和用过的电泳液必须要收集到专用的容器中保存,转运和处理,含有少量溴化乙淀的实验室污水也要确保严格环保处理。长期一来,溴化乙淀就是各个生物实验室不得不用却叫人xx的试剂!
最近发现 2家美国生物公司出品了溴化乙淀的替代物:
1. EZ Vision是一种xx无害的溴化乙淀替代物,敏感度高,能够辩别 0.25ng浓度的 DNA含量,是一种很好的溴化乙淀替代物。美国 ISCBioExpress公司有售。
2. 另一种替代剂叫 Gel Red,也是一种红色的染料,出自美国 Phenix Research公司, Gel-Red也是xx无害的红色染料试剂,作用也是能够整合到 DNA双链中,在 302-312nm的莹光中显色红色,而且敏感性高于溴化乙淀。 GelRed的市场价格是 0.5ml 100-120美元,比溴化乙淀( 10mg/ml) 1ml 约 10美元的价格是贵了些,但是 0.5ml的 Gel-Red可以制做 100ml的标准琼脂糖( Bio-Red的凝胶设备) 200-250块胶,这对于一个中小型试验室来说,足够用 1-2个月了。
EZ Vision和 GelRed这 2种染料都可以使用原有的使用溴化乙淀的紫外光透射仪,改用 EZ Vision和 GelRed后实验室原有的设备不变,观察分析 DNA, PCR产物时却没有了毒性试剂了,这对于我们的环境保护,科研人员的健康都是一个根本性的转变。希望各位同行尽快使用溴化乙淀替代剂,让我们有一个安全,xx无污染的健康的实验室!