色谱柱的再生方法及注意事项(国产色谱仪分析应用)

色谱柱的再生方法及注意事项(国产色谱仪分析应用)——南京科捷分析仪器有限公司

色谱柱的再生

  因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。色谱柱 江苏

依次采用不同极性溶剂冲洗色谱柱,每次20-30倍的色谱柱体积。

 

1)反相色谱柱:

   10%甲醇水溶液乙腈异丙醇甲醇10%甲醇水溶液。

 

2)正相色谱柱:

   正己烷三氯甲烷乙酸乙酯异丙醇甲醇异丙醇乙酸乙酯三氯甲烷正己烷

   需要注意的是,再生处理正相色谱柱时,所使用的试剂需要严格除水。色谱柱 江苏

 

3)对于生物类样品污染的色谱柱:

   如果生物材料血浆或血清样品注入色谱柱,在大多数情况下,纯有机溶剂(如乙腈或者甲醇)并不能溶解肽和蛋白质,用他们清洗色谱柱是无效的。然而,有时使用有机溶剂与缓冲物、酸或离子对试剂的混合物却是有效的。对于HPLC反相柱清洗蛋白质类物质可用下述组成的溶剂系统:

   1%的乙酸水溶液(加入5%的甲醇)色谱柱 江苏

   1%的三氟乙酸水溶液(加入5%的甲醇)

   0.1%四氢呋喃/正丙醇=40/60(需降低流速)

   DMSO/=50/50或者DMF/=50/50V/V)。

或者:

   将色谱柱反转,与检测器断开,用5倍柱体积的{bfb}异丙醇清洗,然后使用3~5倍柱体积的二氯甲烷,3~5倍柱体积的异丙醇,{zh1}再返回原始的溶剂体系(此操作xx当色谱柱寿命快到时使用)。色谱柱 江苏

如果这样处理后柱子还没有好转,说明柱子的寿命已经到了,该更换新的色谱柱了。

   不过,通常情况下,一根色谱柱的寿命长短,xx取决于应用的样品和分析条件,如果被分析的样品成分以及流动相比较简单,色谱柱的寿命就会比较长,但是相反的,如果被分析样品的成分表较复杂,例如生物样品、中药提取成分等,就会对色谱柱造成很大的影响,导致色谱柱寿命迅速下降。色谱柱 江苏

   附:体积计算表

 

 

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