色谱柱的再生方法及注意事项(国产色谱仪分析应用)——南京科捷分析仪器有限公司
色谱柱的再生
因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。色谱柱
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依次采用不同极性溶剂冲洗色谱柱,每次20-30倍的色谱柱体积。
1)反相色谱柱:
10%甲醇水溶液—乙腈—异丙醇—甲醇—10%甲醇水溶液。
2)正相色谱柱:
正己烷—三氯甲烷—乙酸乙酯—异丙醇—甲醇—异丙醇—乙酸乙酯—三氯甲烷—正己烷
需要注意的是,再生处理正相色谱柱时,所使用的试剂需要严格除水。色谱柱 江苏
3)对于生物类样品污染的色谱柱:
如果生物材料血浆或血清样品注入色谱柱,在大多数情况下,纯有机溶剂(如乙腈或者甲醇)并不能溶解肽和蛋白质,用他们清洗色谱柱是无效的。然而,有时使用有机溶剂与缓冲物、酸或离子对试剂的混合物却是有效的。对于HPLC反相柱清洗蛋白质类物质可用下述组成的溶剂系统:
1%的乙酸水溶液(加入5%的甲醇)色谱柱 江苏
1%的三氟乙酸水溶液(加入5%的甲醇)
0.1%四氢呋喃/正丙醇=40/60(需降低流速)
DMSO/水=50/50或者DMF/水=50/50(V/V)。
或者:
将色谱柱反转,与检测器断开,用5倍柱体积的{bfb}异丙醇清洗,然后使用3~5倍柱体积的二氯甲烷,3~5倍柱体积的异丙醇,{zh1}再返回原始的溶剂体系(此操作xx当色谱柱寿命快到时使用)。色谱柱
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如果这样处理后柱子还没有好转,说明柱子的寿命已经到了,该更换新的色谱柱了。
不过,通常情况下,一根色谱柱的寿命长短,xx取决于应用的样品和分析条件,如果被分析的样品成分以及流动相比较简单,色谱柱的寿命就会比较长,但是相反的,如果被分析样品的成分表较复杂,例如生物样品、中药提取成分等,就会对色谱柱造成很大的影响,导致色谱柱寿命迅速下降。色谱柱
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附:体积计算表
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