根据塔板理论，有效理论塔板数n有效是衡量柱效能的指标，表示组分在柱内进行分配的次数，但样品中各组分，特别是难分离物质对（即物理常数相近，结构类似的相邻组分）在一根柱内能否得到分离，取决于各组分在固定相中分配系数的差异，也就是取决于固定相的选择性，而不是由分配次数的多少来确定。因而柱效能不能说明难分离物质对的实际分离效果，而选择性却无法说明柱效率的高低。因此，必须引入一个既能反映柱效能，又能反映柱选择性的指标，作为色谱柱的总分离效能指标，来判断难分离物质对在柱中的实际分离情况。这一指标就是分离度R。
分离度又称分辨率，其定义为：相邻两组分色谱峰的保留时间之差与两峰底宽度之和一半的比值。 式中tR1、tR2分别为1、2组分的保留时间；Wb1、Wb2分别为1、2两组分的色谱峰峰底宽度；W1/2(1)、W1/2(2)分别为1、2两组分色谱峰的半峰宽。 显然，分子项中两保留时间差愈大，即两峰相距愈远，分母项愈小，即两峰愈窄，R值就愈大。R值愈大，两组分分离得就愈xx。一般来说，当R=1.5时，分离程度可达99.7%；当R=1时，分离程度可达98%；当R<1时，两峰有明显的重叠。所以，通常用R≥1.5作为相邻两峰得到xx分离的指标。 由于分离度总括了实现组分分离的热力学和动力学（即峰间距和峰宽）两方面因素，定量地描述了混合物中相邻两组分实际分离的程度，因而用它作色谱柱的总分离效能指标。分离度与柱效能（n有效）和选择性因子三者的关系可用数学式表示为：
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