一、实验目的：
1、掌握两栖动物外周血淋巴细胞培养的基本方法。
2、对细胞培养获得的染色体进行观察。
3、提高学生实验素质，培养学生学研究和创造性能力。

二、实验条件：
1、材料：两栖动物
2、仪器：显微镜、超净工作台、培养箱、离心机、恒温水浴锅、冰冻玻片、离心管 、注射器、针头、吸管、酒精灯、微孔滤器、滤膜、培养瓶、解剖盘、解剖剪、镊子、量筒等。
3、药品：0.2%肝素钠、RPMT1640培养基、植物血凝素、0.1%秋水仙素、0.075M KCl、固定液、Giemsa染液、磷酸缓冲液 等。
4、培养基：（1）RPMI1640培养基     4ml
           （2）小牛血清           1ml
           （3）双抗（青霉素和链霉素）各 2.5μl
           （4） PHA    0.15ml （浓度1mg/ml） 用5%NaHCO3调PH值为7.2，过滤xx。

三、实验要求：
1、选择染色体清晰，分散好的中期分裂相，计数染色体，显微摄影、并打印出照片。
2、分析成功或失败的原因。
3、PHA的作用是什么？ 本次实验为什么低渗温度选择26℃，而在小鼠骨髓细胞染色体制片中低渗温度选择在38 ℃？
4、写出实验报告。

四、使用说明
血细胞培养是制备人和珍稀、濒危动物等染色体标本的主要方法之一，动物外周血淋巴细胞一般情况下不进行分裂。如果在培养液中加入一种强有力的有丝分裂原－－－－植物血凝素（PHA），这种淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞，进入有丝分裂。

离心机应用中的腐蚀问题

    分离技术是一项应用极其广泛的技术，适用于医药、化工、冶金、纺织、环保、食品、军人等各行业，它是借离心力为推动力，将液——固、液——液或液——液——固等悬浮液或乳浊液按物性特点，分离要求的不同达到不同分离目的的一种设备，由于其结构简单、效率较高，纯物理分离过程，能充分保证分离物料的特性。因此，离心机的市场应用极其广泛。大多数厂家更多关心的是离心机的分离性能、强度要求，对腐蚀因素的影响往往重视不够，从而带来了一些负面的影响，本文就此问题作一些分析说明，供大家探讨。

    众所周知，腐蚀的危害是极其巨大的，在世界上有许多事例可以说明，离心机是一种高速旋转的设备，其安全要求与压力容器同样重要，大多数离心机生产企业在设计、选型和应用中，更多虑了均匀腐蚀对强度零件的影响，疏忽了结构设计，加工工艺等对腐蚀环境的适应性，导致了一些严重的后果。不仅零件出现腐蚀倾向，污染被分离物料；更严重的甚至造成机毁人亡。

    一、离心机环境

    离心机按功能、结构分为不同类型的设备，但都有共同特点：

    1、转鼓为高速旋转件；

    2、以转鼓为主体构成分离空间；

    3、转鼓呈异形结构；

    4、转鼓内还有其他一些联接件或配套件。

    转鼓的这几个特点，说明了离心机的核心零件是一个应力件，它的异形几何形状，导致了零件的应力分布多区，多零件的配合，又使形成电偶对的机会成为可能，这都是值得注意的一些情况。

    二、可能的腐蚀现象

    金属腐蚀形态主要分为均匀腐蚀和局部腐蚀两大类，前者因为表观现象容易发现，而且在大多数手册资料数据中都表述比较清楚，在此不作详述，仅对后者进行一些探讨。

    局部腐蚀只发生在局部，是一个极其严重、危害较大的一种破坏，如孔蚀、缝隙腐蚀、晶间腐蚀、应力腐蚀，磨损腐蚀等等，在离心机中，局部腐蚀普遍存在，应着重从其形成机理方面加以分析，采取措施，加以克服。

    1、应力腐蚀是在腐蚀性环境中，由于受一定的拉应力作用而引起的损害。它具备以下特征：残余拉应力、外加拉应力、腐蚀性渗透环境、局部缺陷。

    2、磨损腐蚀即零件表面同时遭受磨损和腐蚀破坏。

    3、晶间腐蚀会造成零件失去强度和延伸性，引起零件脆断，它是一种从表面沿晶粒边界向内发展，外表面没有腐蚀迹象的危害性损害。

    4、孔蚀是一种高度腐蚀的现象，主要存在于易钝化的金属中，如不锈钢等，由于表面局部存在的可能缺陷，溶液中又存在能破坏钝化膜的活性离子（如卤族离子），钝化膜被局部破坏，从而形成电偶对，造成孔蚀。孔蚀形成后，由于离心力的作用，将加速孔内电偶的动态过程，从而保证孔腐蚀的持续性，直至穿孔，这一点与静态下的孔蚀现象不同。