HPLC也会“感冒”？

  HPLC是“高效液相色谱”的简称，仪器分析的一个重要领域，也是我硕士期间的研究方向，到现在已经使用过很多不同的型号，应该说比较熟悉吧。然而今天却遇到一件很蹊跷的现象，S老师的研究生小李向我抱怨说，前段时间用来分析氨基酸的实验条件出现问题，有两种成分分离不开了，尝试过很多调整包括流动相的配制、梯度表的修改、长时间的淋洗平衡等等都无济于事，不知道问题出在哪里，万般无奈下甚至都想过要更换色谱柱重新建立条件。

  我先调出了以往的结果，与最近的图谱进行了仔细比较，发现18种氨基酸中只有位于中部的苏氨酸和甘氨酸发生了重叠，其余成分的分离效果基本没有发生显著改变且重现性较好，由这些现象基本可以排除输液泵以及切换阀工作性能不稳定的理由。问题出在哪里呢？从两种成分的化学结构来看，柱温度的的改变有可能会影响两者的相对位址（保留时间），然而小李说柱温的设定并无差错，一直是40度。这时我忽然想到了天气！这几天寒流过境，室内温度也随之下降，有可能会导致恒温柱箱中的实际温度受到影响。苏氨酸较甘氨酸分子量更大，对温度变化更敏感，降低温度会使保留时间延长，色谱峰后移并与甘氨酸重叠。如果是这样，我们把柱温箱的温度升高1度应该可以观察到效果，果然，在41度下两者有了明显的分离趋势，再作调整很快得到了满意的结果。

  我经常对学生们讲，科学研究的对象是自然规律，有时候它好像很不听话，这时候需要我们仔细的观察和思考，然后通过试验向它发问，而那些表现其实就是它的回答，如果稍不留意就错过{zj0}的对话机会。例如这一次就是仪器通过图谱告诉我们：它“感冒了”需要保暖，很高兴我听明白了。然而下一次呢？