测定食品中胆固醇的方法

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测定食品中的胆固醇主要方法气相色谱法和比色法。色谱必须有气相色谱仪,这种设备是很昂贵的,这是在中国并不普遍,选择经济,方便,实用的比色法测定食品中的胆固醇。
比色法
1 。类固醇化合物的原则和作用的酸试剂可脱水,发生聚合反应,产生一个强大的显色反应。
2 。采用这种方法适用于测定动物食品中的胆固醇。
3 。仪器( 1 )常用的实验室设备( 2 )分光光度计( 3 )电热恒温水浴
4 。试剂所有试剂,如果指定要求分析纯意味着所有实验用水,是蒸馏水。 ( 1 )石油(石油产品)醚( 2 )乙醇( 3 )浓硫酸( 4 )冰醋酸(优秀纯) ( 5 )膦酸( 6 )胆固醇标准(美国西格玛公司)标准储备液:即检查的准确性,胆固醇100毫克, (胆固醇标准机内打开)溶解于冰醋酸,并定于熔化100毫升。浓度1克/ L的保持2个月。标准工作溶液:采取的标准储备液10毫升,与冰醋酸中会被溶解到100毫升。浓度0.1克/ L的当液体编制临时。 ( 7 )铁( Fe食品)矾色液体:液体储量:四点四六三克解散硫酸铵[ FeNH4 (硫酸) 12月2号水]磷矿100ml85%在干燥与储存,这一解决方案在室温下稳定。 *铁明矾溶液需要储备的头两个星期,准备在实验中,不容易溶解硫酸铵,在每日费率为短期溶质振摇xx溶于酸,然后溶解到卷集。工作液: 10毫升液体储量提请与浓硫酸稀释至100毫升。储存在干燥。 ( 8 ) 50%氢氧化钾溶液: 50克氢氧化钾溶解在水中,会被溶解到100毫升。 ( 9 ) 5%氯化钠溶液:溶解五克氯化钠在水中,会被溶解到100毫升。 ( 10 )纯( 99.99% )
5 。步骤
5.1样品的提取及含量测定脂肪:食品的种类是根据索氏提取,研磨和提取洛高脂肪,并计算每100克脂肪的食物。
5.2胆固醇测定样品:准确提取油脂变得3-4滴(约胆固醇载300 500μg )抽样的样本量可能会增加或减少胆固醇的浓度。放置在二五毫升试管购买四毫升乙醇, 0.5ml50%氢,氢氧化钾,在65 ℃恒温水浴中1小时皂化。皂化时每隔20-30分钟的{dy},使皂化振摇xx。皂化完成后,删除该管,冷却。 3ml5%添加氯化钠, 10毫升石油醚,紧密玻璃插头,振摇两分钟,站在分层(一般需要1小时以上) 。
请检查上层石油醚二毫升,放置在一个玻璃试管10毫升与插件在65 ℃恒温水浴,干燥的氮气,通过增加4毫升乙酸,二毫升彩色铁矾溶液,混合,放置15分钟在560 – 575nm比色。 5.3标准曲线:准确吸取工作液胆固醇0 ; 0.5 ; 1.0 ; 1.5 ;二点○毫升被安置在一○毫升试管,在试管中加入冰醋酸,使总量四毫升。沿墙壁增加二毫升液态铁矾颜色,混合, 15-90分钟,560 – 575nm比色。
6 。分析的结果中的胆固醇含量的样品( mg/100g ) = C的×第V / V字× 1 /宽× F/1000其中C =测量光密度胆固醇标准曲线显示的数额胆固醇(微克) V =总体积的石油醚(毫升) V字=体积石油醚提取(毫升)工作=体重,脂肪检查( g )项女=脂肪含量的样品( g/100g ) 1 / 1000 =转换成100克粮食每几毫克胆固醇。
7 。注意:同一实验室在同一时间,或两次测量之间的差异不应超过平均10% 。

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