溶血性链球菌及检验
溶血性链球菌及检验 [转贴 2010-04-09 11:33:15]   

一、生物学特性
  1、形态与染色
  链球菌呈球形或椭圆形,直径0.6-1.0μm,呈链状排列,长短不一,从4-8个至20-30个菌细胞组成不等,链的长短与xx的种类及生长环境有关。在液体培养基中易呈长链,固体培养基中常呈短链,由于链球菌能产生脱链酶,所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜,继续培养后消失。该菌不形成芽胞,无鞭毛,易被普通的碱性染料着色,革兰氏阳性,老龄培养或被中性粒细胞吞噬后,转为革兰氏阴性。
  2、培养特征
  需氧或兼性xxx,营养要求较高,普通培养基上生长不良,需补充血清、血液、腹水,大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃,在20-42℃能生长,最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链,管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落,不同菌株溶血不一。
  3、生化反应
  分解葡萄糖,产酸不产气,对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异。一般不分解菊糖,不被胆汁溶解,触酶阴性。
  4、抗原结构
  链球菌的抗原构造较复杂,主要有三种:
  (1)核蛋白抗原或称P抗原,无特异性,各种链球菌均相同。
  (2)多糖抗原或称C抗原,系群特异性抗原,是细胞壁的多糖组分,可用稀盐酸等提取。
  (3)蛋白质抗原或称表面抗原,具有型特异性,位于C抗原外层,其中可分为M、T、R、S四种不同性质的抗原成分,与致病性有关的是M抗原。
  5、分类
  根据链球菌在血液培养基上生长繁殖后是否溶血及其溶血性质分为三类。
  (1)α-溶血性链球菌:菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环,也称甲型溶血,这类链球菌多为条件致病菌。
  (2)β-溶血性链球菌:菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、xx透明的无色溶血环,也称乙型溶血,因而这类菌亦称为溶血性链球菌,该菌的致病力强,常引起人类和动物的多种疾病。
  (3)γ-链球菌:不产生溶血素,菌落周围无溶血环,也称为丙型或不溶血性链球菌,该菌无致病性,常存在于乳类和粪便中,偶尔也引起感染。
  6、抵抗力
  该菌抵抗力一般不强,60℃30min即被杀死,对常用消毒剂敏感,在干燥尘埃中生存数月。乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。青霉素是链球菌感染的{sx}xx,很少有耐药性。
  二、流行病学
  溶血性链球菌在自然界中分布较广,存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中,可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染,被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。一般来说,溶血性链球菌常通过以下途径污染食品:
  1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染;
  2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时,其奶和肉尸某些部位污染;
  3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。
  三、致病性
  溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、xx性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。溶血性链球菌的致病性与其产生的毒素及其侵袭性酶有关,主要有以下几种:
  1、链球菌溶血素:溶血素有O和S两种,O为含有-SH的蛋白质,具有抗原性,S为小分子多肽,分子量较小,故无抗原性。
  2、致热外毒素:曾称红疹毒素或猩红热毒素,是人类猩红热的主要毒性物质,会引起局部或全身红疹、发热、疼痛、恶心、呕吐、周身不适。
  3、透明质酸酶:又称扩散因子,能分解细胞间质的透明质酸,故能增加xx的侵袭力,使病菌易在组织中扩散。
  4、链激酶:又称链球菌纤维蛋白溶酶,能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶,具有增强xx在组织中的扩散作用,该酶耐热,100℃50分钟仍可保持活性。
  5、链道酶:又称链球菌DNA酶,能使脓液稀薄,促进病菌扩散。
  6、杀白细胞素:能使白细胞失去动力,变成球形,{zh1}膨胀破裂。
  四、检验和控制
  (一)检验
  1、样品处理:取25g固体(或25mL液体)检样加入225mLxx生理盐水,制成混悬液。
  2、吸取5mL混悬液接种至50mL葡萄糖肉浸液肉汤,或直接划线于血平板(如检样污染严重,可同时接种5mL至匹克氏肉汤),36℃培养24h,接种血平板,36℃培养24h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落,在血平板上分纯,观察在液体和固体中的培养特征、溶血情况及革兰氏染色、形态,并进行链激酶试验和杆菌肽敏感试验。
  3、链激酶试验:吸取草酸钾血浆0.2mL,加0.8mLxx生理盐水,混匀,再加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL,混匀,置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝固,观察凝块重新xx溶解的时间,xx溶解为阳性,如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照,用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。
  4、杆菌肽敏感试验:取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用xx镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上,36℃培养18-24h,如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做对照。
  (二)控制
  1、防止带菌人群对各种食物的污染,患局部化脓性感染、上呼吸道感染的人员要暂停与食品接触的工作。
  2、防止对奶及其制品的污染,牛奶场要定期对生产中的奶牛进行体检,坚持挤奶前xx,一旦发现患化脓性乳腺炎的奶牛要立即隔离,奶制品要用xx过的原料,并注意低温保存。
  3、在动物屠宰过程中,应严格执行检验法规,割除病灶并以流水冲洗;在肉制品加工过程中发现化脓性病灶应整块剔除。 科学技术的发展和流量测试技术研究的深入,近几年来气体超声流量计的问世引起了流量界广泛的兴趣。美国AGA于1998年发布了AGA9号报告《用多声道超声流量计测量天然气流量》;之后不久ISO于同年12月也发布了ISO/TR-12765《用时间传播法超声流量计测量封闭管内的流体流量》技术报告。为了适应我国西部天然气开发,满足西气东输工程的要求,我国于2001年内编制了GB/T 18604《用气体超声波流量计测量天然气流量》的国家标准。同时,为了验证该类型流量计的性能,西南油田分工司率先首批有针对性地引进了国外二个公司的超声流量计产品,并在华阳天然气流量测试中心,对其性能进行了系统测试,之后在典型站场上进行了工业性试验,为今后该类型流量计在我国天然气领域中的推广使用提供了宝贵经验。

准确地进行天然气流量测量是企业部门进行经济分析,降低运行成本的关键一环,直接地影响着一个企业的经济效益,倍受供需双方关注。随着世界能源供求日益紧张;人们都十分关心并寻求一种精度高,适应性强的流量计来测量天然气流量,以维护企业的利益。超声流量计自投放市场以来,与目前其他类型流量计相比,显然有着更多更好的性能特性,因而倍受人们青睐。近几年,在北美及加拿大新建设几条大型输气管道工程中,如AIIiance管线、Vector管和北部边疆等管道工程中已开始用超声流量计,作为贸易计量,应用效果已得到证实。最近二、三年来,我国先后从国外引进了超声流量计约30台,西南油田分公司占三分之一。据不xx统计,我国目前所使用的超声流量计约占世界使用量的5%,可见我国流量界是相当关注这一新型流量仪表。目前,正在拟建中的新疆轮南至上海的西气东输工程,贸易计量的{sx}流量计为超声流量计,口径DN250~300mm;中小型站场选用DN50~200mm涡轮流量计。随着我国天然气工业的发展,超声流量计在天然气工业领域中的应用前景看好。

随着科学技术发展,出现新型流量计是必然的。然而由于天然气流量测量技术本身涉及面广,随着对象不同,对流量计有着不同的要求,也就是说客观上多种流量计并存,才能满足不同场合和层次的需求。尽管超声流量计与目前使用广泛的孔板流量计相比,有着更多的优点,主要反映在有较低的系统基本投入,双向测量,大量程比,无压损,无可动部件和高精度等。但由于孔板流量测量技术历史悠久,标准化程度高,使用简单可靠,一般无特殊要求时无须标定等特点。由此可见,尽管超声流量计已问世,它只能起到互补作用,可以肯定不可能xx替代。在今后相当长一个时期内,由于种种因素的制约,特别是标定不能获得妥善解决之前,孔板流量计仍是天然气计量主要手段之一。

任何一种新型流量计多获得工业化应用和认可都要历经一个相当长的过程,这也就意味着人们一方面对它的认识,另一方面流量计本身与应用中所暴露出来的问题,能否得到满意的解决。就超声流量计而言,仍有一些实际使用中的工作需要做,超声流量计工业化试验试用还需要进一步开展。尽管目前发布有AGA N09号报告,ISO发布有TR12765技术文件,我国也制定了相应的GB/T18604标准。从工业化,标准化应用角度来看,超声流量计要获得工业上广泛应用,还应当解决以下四个方面问题

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