血清成分分析4

表二、乌鸡与家鸡血清中谷丙转氨酶活力测定表

由表二可知家鸡的谷丙转氨酶活力比乌鸡大

4.3血清清蛋白与γ-球蛋白的分离与鉴定

4.3.1凝胶洗脱结果

图一 凝胶洗脱曲线

由上图可知蓝色的蓝葡聚糖比黄色的重铬酸钾先流过凝胶柱,且蓝葡聚糖在第6管时流尽,第八管开始流出的为重铬酸钾,中间相隔约一管的时间。这一时间差与凝胶柱的长度以及网孔大小有关。且蓝葡聚糖在第45管时,达到溶质{zd0},即浓度{zd0};重铬酸钾在第13管时达到溶质{zd0}

4.3.2醋酸纤维素薄膜电泳的实验结果

经漂洗后,全血清薄膜上可呈现清晰的 4条区带,由正极端起,依次为清蛋白、α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白

因球蛋白分离不纯,其中还含有清蛋白,所以其血清电泳图谱共分2条带,为γ球蛋白和清蛋白。

实验结果讨论:

1血清胆固醇的定量测定
    
胆固醇是人体必需的物质,但是摄入过多就会引起一系列的心脑血管病。目前胆固醇偏高的人群日益增多,我们可以通过对家鸡及乌鸡中胆固醇含量的测定,找到更适于这类人群

食用的家禽。 因胆固醇及其酯在硫酸存在下与邻苯二甲醛作用生成紫红色物质,可以方便测出两者含量的差别。由上述数据分析可以得到乌鸡血清中胆固醇的含量更低,更适于胆固醇含量高的人食用。
2血清清蛋白与γ—球蛋白的分离与鉴定

γ—球蛋白在33%酸铵溶液中不溶,而血清清蛋白则需在饱和硫酸铵中不溶,才会析出。所以可以通过盐析的方法分离鉴定血清清蛋白与γ—球蛋白。
通过电泳的方式可以分析不同条带上是何种蛋白质,醋酸纤维素薄膜电泳法可得鸡血清上只有四个条带,这四条条带从负极到正极分别是γ—球蛋白、β蛋白、α蛋白、清蛋白。在这个实验中,可以掌握不同蛋白质的分离与鉴定,同时可用蔗糖对蛋白质进行浓缩。
3血清谷丙转氨酶活性与活力单位的测定
实验中,我们将谷氨酸、丙氨酸、含有不同酶液的血清样品点样在滤纸上,新鲜肝糜的样品中有谷丙转氨酶,是以可以将部分谷氨酸转化成丙氨酸,煮沸的酶液因为酶在高温下失活,是以谷丙转氨酶没有活性了,比较谷氨酸、丙氨酸的层析结果,可以得到样品中含有谷氨酸和丙氨酸。因为丙氨酸是非极性氨基酸,与滤纸的结合比较疏松,而谷氨酸是极性氨基酸,与滤纸的结合比较紧密,层析过程中跑的速度比较慢,所以靠近圆点的氨基酸是谷氨酸,而远离圆点的则是丙氨酸。定量的测出每100ml中酶活力单位的大小,可得家鸡的酶活力单位比较大。

4凝胶层析

由洗脱曲线可以得到,蓝葡聚糖洗脱速度比较快,因为样品在通过层析柱时,因为分子量较大的物质因为不能或较难通过网孔而进入凝胶颗粒,而是沿着凝胶颗粒间的间隙流动,所以流程较短,{zx0}流出层析柱,反之,分子量较小,流程较大,流出较晚。



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