草莓组织培养xx苗及快速繁育技术企业库|免费b2b网站

   草莓组织培养是通过无菌操作，将植物体的一部分（外质体）接种到培养基上，在人工控制的条件下（xxxx、xx、温度、光照）进行培养，使其产生完整植株的过程。
   植物组织培养脱毒是目前广泛应用和正在继续发展的主要脱毒方法，依据的主要原理是病毒在植物体内的分布不均，及植物细胞组织的全能性。采用不含病毒的组织或器官，通过组织培养分化，繁育成无病毒的植株材料。组织培养亦可和作物遗传工程，品种改良和果树植物的快速繁育、工厂化繁育相结合,在农业高新技术的应用上，前景十分广阔。
一、草莓组织培养的原理
   植物细胞的全能性：所谓全能性是指植物的每个细胞都具有植物遗传信息和发展成xx植物的可能性。在一个完整的植株上某部分的体细胞只表现一种形态，承担一定的功能，这是因为该细胞受到具体器官或组织所在环境的束缚。一旦脱离原器官或组织，在一定的营养、xx和外界条件作用下，就可能表现出全能性。
   植物的再生性：从植物分离出的根、茎、叶等器官，切口组织受到损伤，在这些受伤部位往往会长出新的器官。在组织培养人工控制培养条件下，通过对培养基的调整，特别是xx水平的调整，可以使在自然条件下再生困难的器官和组织，顺利再生。
   茎尖培养脱毒：植物茎尖分生组织中细胞间连丝发育不全或太细，使病毒不能通过扩散作用进入分生组织。次之，病毒复制、运输速度与茎尖细胞生长速度不同，病毒向上运输速度慢，而分生组织细胞繁殖快。因此采集茎尖可以获得无病毒的培养材料。
   草莓是多年生宿根草本植物，主要以匍匐茎繁殖为主，随着种植年限的加长，病毒病的种类、发病率逐年上升。致使草莓产力量下降，品质变劣。国外研究表明，在周围1—2km内有老草莓园存在时，定植的草莓xx苗1—2年内虫媒传病毒可使草莓减产约20—30%。因此，在国外使用草莓无病毒苗是重要的良种繁育措施，也是草莓重要的增产措施。日本自1969年开始供应无病毒苗，现有蔬菜试验场负责培育、繁殖、保存无病毒母株，再经原苗繁殖后供应生产者。组织培养方法在草莓无性快速繁殖上的应用，为生产者提供了数量更多的优质种苗。国内目前许多科研单位都进行了草莓组织培养脱毒的快繁的研究，一些较大的种植区已经大量的生产，但由于苗木成本较高，在生产上难以大面积推广。目前广大科技工作者正在研究新的方式方法，降低成本，使这一技术早日得到广泛应用。

二、设备器材
   房屋布局：设准备室，无菌室、培养室、温室、网室
   1、准备室：仪器、原料的洗涤、干燥，药品称量、培养基制作xx。
   2、设备仪器：高压xx锅、电（气）炉，分析天平、药品柜、洗涤池、冰箱、容量瓶、培养瓶（三角瓶或小罐头瓶）。
   3、无菌室：进行无菌操作，设紫外线杀菌灯，超净工作台（或接种箱）
   设备仪器：仪器车、高倍解剖镜、酒精灯、喷灯、解剖针、刀、剪、镊子等。
  4、培养室：电光培养架若干个，温度控制设备，湿度控制设备，培养架应具有2000—3000Lx的光照强度，室温应在20—30℃内进行调节。
    5、温室、网室：从培养基生根培养后，小苗经过温室驯化，长出3—5片叶后，可移栽入网室，网室是{dy}代母株繁育的场所，温室在2—4月使用，温度在25℃左右，使用杀虫、xx剂进行xx。

三、培养基的成份及制作  MS培养基成份（mg/L）

	药品	每升培养基含量（mg）	配培养基母液
	药品	每升培养基含量（mg）	母液倍数	每升母液称药量（mg）	每升培养基用母液量ml
1	NH4NO3 KNO3	1650 1900	10	16500 19000	100
2	MgSO4.7H2O MnSO4.4H2O ZnSO4.7 H2O CuSO4.5 H2O	370 223 8.6 0.0025	100	37000 22300 860 0.25	10
3	CaCl2.2H2O KI CoCl.6H2O	440 0.83 0.025	100	44000 83 2.5	10
4	KH2PO4 H3BO3 Na2MoO4.2H2O	170 6.2 0.25	100	1700 620 25	10
5	FeSO4.7H2O Na.EDTA	27.85 37.25	100	2785 3725	10
6	盐酸硫胺（VB1）盐酸吡哆素（VB6）VB6 烟酸VPP 甘氨酸肌醇	0.4 0.5 0.5 2 100	100	40 50 50 200 10000	10
7	蔗糖	30000
8	琼脂	10000

   xx的使用量应根据不同培养时期而不同，应分为初代培养基、继代培养基、生根培养基，目前使用的xx主要为6苄基嘌呤（BA）浓度为0.5—1mg/L。生根培养基去掉BA即可。
   培养基的制作
按配方称取1、2、3、4、5、6，药品按50或100倍的浓度用蒸馏水配制成母液放入冰箱保存，使用时按比例稀释，制作培养基时，将母液混合定容、加热溶入蔗糖和琼脂加入6苄嘌呤，用NaOH与HCl调整培养基为pH7.0 左右，倒入培养用的三角瓶中，每瓶倒入30ml左右，用棉塞牛皮纸封口，放进高压xx锅，温度达到121℃，保持15—20分钟，xx后静置冷却备用。

四、培养程序
   培养材料：取草莓新生未长根叶匍匐茎，茎粗在2—4mm，在自来水下冲洗24 小时，在超净工作台上，用0.1%升汞(HgCl2)处理2—3分钟，在用xx水冲洗3—4次，或采集夏季生长期抽生的匍匐茎茎尖进行表面xx后、直接在解剖镜下逐层剥离。
   初代培养(6—10月 )：在解剖镜下用xx镊子，解剖针剥去叶片（注意每剥一层应对器具进行xx）。直至露出生长点。切取生长点0.3mm的茎尖，带{dy}叶原基，植入含6BA 1—1.5mg/L的培养基中，初代培养使用三角瓶时可每瓶接3—5个茎尖，使用试管时可接一个茎尖，接种后，应将培养瓶放在温度22--25℃，光照2000—3000lx的环境中，并定期观察，若有xx污染的培养瓶应淘汰，xx污染的应将未污染的小芽及时转接。直至生长点分化出大量芽丛就可进入继代培养。
   继代培养（10月—翌年1、2月）：
   继代培养的培养基同初代培养的xx水平开始为1.5mg/L，以后逐渐降至0.5mg/L，一般转接后一个月应进入下一次继代培养，初代转入继代时，可将初代芽丛分切成4—5份芽丛，一般可以继代4--5次，每继代一次，繁殖材料数量可增加4—6倍。
   生根培养（1—3月）：
   生根培养是组织培养实验室阶段的{zh1}一次培养。目的是使{dy}阶段和第二阶段培养的苗发出不定根，并使苗继续生长，由于前一阶段的培养中，芽的生长往往受较高浓度细胞分裂素的抑制，在生根培养基中将去掉6BA，芽进一步长大,基部形成根，再生根培养基中，也可以加入适量碳黑造成根系避光环境，则生根效果更好。
   试管苗的锻炼和移植（2—4月）：

   当试管草莓苗长至3--5个叶片、 5条以上根时，可以进行移植，移植前应逐步将培养瓶移植自然光下，移栽前两天打开瓶口，使小苗充分接受自然环境锻炼，接受锻炼的细小苗叶柄变红，叶片角质层加厚。这样的小苗即可出瓶。出瓶时用镊子夹住小苗从培养瓶轻轻拉出，在水中洗去琼脂，放入加水的磁盘中准备移植。小苗可移植到温室的珍珠岩、蛭石或富含有机质的壤土中，移植到珍珠岩、蛭石中的小苗应定期浇营养液，土壤中的小苗应保证土壤湿润。温度维持在18—26℃，待小苗长出三片以上正常叶时，成为原种苗，原种苗可以移入大田网室中繁育，原种苗移植应在5月底以前完成，种植密度为每亩1000—1500株，为提高繁殖系数，可采用赤霉素处理和去除花蕾，同时做好网室内的病虫害防治，定期喷施杀虫xx剂及时浇水除草。这样，每一株原种苗一年可繁殖50—100株良种苗。
   生产苗的繁殖：翌年，用在网室中繁殖的良种苗作母株，定植于繁殖圃，繁殖圃周围1—2km内应没有果园及草莓园，定植密度每亩1000—1500株，定植时间应选在3月中下旬，严格管理，当年生产出的种苗即可用于鲜果生产，草莓xx苗用于大田生产，可增产20—50%，这是由于xx苗长势旺盛，果多，单果重量大。且果实质量好。
   无病毒苗在大田使用一段时间后，逐渐又被病毒感染，一般新种植区周围无老草莓园时，可保证4—5年换种一次，如果是老草莓种植区，则需要2—3年就应该换种。
   草莓病毒的检测：
   采用组培脱毒手段获得xx苗后，还需要进一步检测鉴定，目前常用的小叶嫁接法采用森林莓和深红莓中选出的指示植物，有UC4、UC5、UC10、UC11、UC12等。

指示植物应在防虫网内隔离栽培，用匍匐茎繁殖，检测时取待检植株上的中间小叶，已xx展开叶为宜。叶柄削成1—1.5cm的削面，取生长健壮的指示植物，去掉中间小叶，在叶柄上削成1—2cm的切口，接入削好的待检接穗，然后用塑料带扎好；每株指示植物接两个接穗，，然获将嫁接苗罩塑料袋，在25℃背阴处1—2天后，移植阳光下7—10天，去掉塑料袋，即可调查发病情况。一般先出现斑驳病毒症状，其次为镶脉病毒，皱缩病毒和草莓和性黄边病毒出现较晚。如果未发现病毒病症状，就证明脱毒成功。