ALL多探针诊断系统

创新设计 {lx1}技术
• 检测包括MLL基因的易位，儿科85%的ALL都有这种易位。
• 检测(ETV6)/AML1，21%的儿科病例中都有这种缺失。
• 检测30%的ALL病例中都有的非整倍体。添加的染色体的数量和同一性具有巨大的预后价值。
• E2A 探针t(1,19)，检测20%的常规检测不能检测的病人。
• IGH 和 MYC鉴别像ALL的伯基特淋巴瘤病人
• 在同一张玻片上快速测定
• 价格优惠

英国Cytocell公司生产的ALL多探针诊断系统，专门为急性淋巴细胞白血病ALL设计的，在一张玻片上同时使用 8种不同的FISH探针，从而可以做到做一次杂交试验而尽可能多地提供病人的基因型信息。

探针1：MYC

8p 染色体的MYC 致癌基因的易位有许多断裂点，但为了能分别阻断而不管易位的存在，多探针诊断系统提供的探针组分别探测的区域很大(717Kb)。最接近的探针(177Kb)是332Kb 3'基因，标记为红色。而最远端的探针(188Kb)是380Kb 5'基因，标记为绿色。正常病人显示为融合或红绿信号密集地并排(2Y)，同时，基因的重排检测为分开的绿色和红色信号(1Y,1G,1R)。和分离细胞一样，这个探针组可在间期细胞中检测 MYC的重排。

MYC阴性标本实例

探针2：P16
9p2 染色体缺失牵涉多种肿瘤，包括大约 10%的P16 缺失的儿科 ALL 病人。为了诊断这些缺失，ALL 多探针检测系统含一支这样的探针：标记为红色，覆盖区域为 9p21 101Kb区域，从P16 3' 59Kb
延伸到 P15的 5'端。探针组还包含一支9号染色体质控探针（D9Z3，9q12上异染色质的阻断），标记为绿色。正常细胞中，探针和质控在两者的同系物会显示有2个红色和2个绿色信号(2R，2G)。检测细胞会显示：1个红色信号和2个绿色质控(1R，2G)，表明如果缺失为半合子，P16从1条染色体中丢失；或者是没有红色信号和两个绿色信号（0R，2G），表明是纯合子缺失。

P16阴性标本实例

探针3：E2A/MLL
E2A 的重排在 ALL病例中相对普通，有两种类型（t (1:19) 和 t (17;19)），占病人数量的 6%。经由 FISH检测到 E2A相关的t(1:19)融合，用标准的细胞遗传学检测存在20-25％患者遗漏。两个分裂探针由1支绿色的 3’探针和1支红色的 5’探针构成，基因的缺失将导致黄色或接近的红/绿的信号发生
分离，变成单独的红色和绿色。
因而，1个正常的细胞有两个融合信号（黄色）。如果 E2A基因因为易位而重排，一支黄色分裂探针分裂成红色和绿色，分别代表重排基因和染色体配偶体。这些病人的信号是3Y、1R、1G。

E2A/MLL阴性标本实例

探针4：

阴性标本实例

探针5：TEL/AML1

这种重排在儿童期B-ALL病例中最普通，使用FISH技术检测到大约21%病例中都有。Cytocell的FISH探针是双色双融合探针，阳性细胞有两个黄色信号。
ETV6 (TEL)探针包含一支含ETV6 5’终点的探针和一支覆盖基因3’区的探针，都标记为红色。对于AML，两支探针都标记为绿色，一支位于RUNX1 3'，另一支在基因的5'末端。t(12:21)的病人，除了相应的12和21号正常染色体的红色和绿色信号，会有两个（黄色）融合信号(1R，1G，2Y)。有ETV6有大量缺失的地方，t(12;21)缺失的信号是1R、2G；或者是，存在t(12;21)重排的信号是1Y、1G。

TEL/AML1阴性标本实例

探针6：M LL

在染色体区带11q23的MLL基因的重排，可以在大约 85%的患B-ALL的婴儿中发现。这支分裂探针由一支绿色5’探针和一支红色3’探针组成，所以基因的破裂会形成1个黄色或紧密相连的红色/绿色信号分裂成独立的红色和绿色信号。在正常的细胞中，会有2个融合信号（黄色）。
如果MLL基因因为易位而重排，一支黄色分裂探针分裂成红色和绿色，分别代表重排基因和染色体配偶体。这些病人的信号是1Y,1R,1G。

MLL阴性标本实例

探针7：BCR/ABL

典型的立体易位t(9;22)在CML中最普遍，但在大约25% 的成人ALL和2-10% 的小儿ALL也有。BCR基因中有两个断裂点簇，较小和较大的断裂簇分别为mBCR和MBCR。ALL几乎大部分是由于断裂点引起的，包括mBCR。在少量的ALL病例中，因为与其它染色体的相互作用，易位不会导致细胞遗传学可见的Philadelphia染色体。在这些病例中，FISH对于突出融合基因很重要。

诊断系统中的BCR探针是双融合探针，包含两支BCR 探针，一支标测 BCR 3'，第二支覆盖了基因5'56Kb的区域。两支都标记为红色并定位，所以断裂点在mBCR或者MBCR都可以导致融合信号。ABL探针毗邻群从FUB3 基因中部到离ABL 5'终点64Kb的位点，覆盖了349Kb。

在正常细胞中，这些探针显示红色和绿色信号，对应各自的同系物（结果形成了2G 2R的构象)。t(9:22)病人，会有两个融合信号（黄色），加上对应的22号和 9号正常染色体的红色和绿色信号（1R 1G 2Y）。

BCR/ABL阴性标本实例

探针8：IGH

t(8:14)易位最显著的结果涉及到MYC原癌基因的重排。然而，在T-ALL中最常见到是IgH基因的非普遍性重排，在B-ALL中也可见到。IGH 基因内所有这些重排有断裂点，Cytocell的 ALL多探针诊断系统中有一支IGH分裂探针，可以检测到一些重排，包括固定和变异段之间区域的 IGH基因分裂，从而鉴别基因中比较少见的重排的IGH易位配偶体染色体。
正常细胞会有2个融合信号（黄色）。IGH上有重排，其中一个黄色信号会分裂成红色或黄色（1Y,1R,1G）。

IGH阴性标本实例