2010-03-02 21:42:53 阅读7 评论0 字号:大中小
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的
重点知识归纳及讲解
(一)酶工程概述
1、酶工程
是研究开发酶的生产、酶的分离与纯化、酶的固定化、酶反应器、酶的应用等工程科学。
酶工程是蛋白质化学与工程科学交叉渗透、相互结合发展形成的一门新的生物技术。它是从应用的目的研究酶,利用酶的特异催化功能并通过工程化技术将相应的原料转化为有用物质的技术。
2、酶的生产方法
(1)提取法
(2)化学合成法
(3)微生物发酵法(主要方法)
3、酶的分离与纯化
离心分离是酶分离提纯过程中最常用的方法。
4、酶反应器
——以酶作为催化剂进行反应所需的设备。
酶反应器具有在常温、常压的条件下发挥作用,反应时耗能和产能比较少等特点。
5、固定化酶
——科学家把酶像化学催化剂一样固定在不溶性的惰性载体上,这样的酶称为固定化酶。
固定化酶是将酶定位或限制在一定的空间范围内,使其在反应后容易与反应底物和产物分开,达到重复使用和连续化生产的目的。
酶的固定方法:吸附法、共价结合法、包埋法。
(二)酶工程的应用
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(三)生物技术与疫苗
1、生物技术
——是指运用生物化学、分子生物学、微生物学、遗传学等学科的原理和技术与工程技术相结合来改造或重新创造设计细胞的遗传物质,培育出新品种,或根据工业规模利用现有生物体系,通过生物化学过程来制造所需要的产品。
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2、疫苗
——一般是指用于预防接种的抗原制剂。
(四)基因工程制药
基因工程制药是指应用基因工程技术生产的用于防治各种疾病的xx,其中活性蛋白质xx最为引人关注。
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(五)xxx的合理使用
1、xxx
——是指由xx、放线菌、霉菌等微生物在代谢过程中所产生的对其他微生物具有拮抗或杀灭作用的一类物质。
2、合理使用
(1)不能过度使用xxx:避免xx的耐药性增强和杀死有益菌。
(2)不能滥用xxx:xxx只能用于xx敏感性xx引起的感染,不能预防感染。
(3)正确使用xxx:xxx不可外用、不等同于xx药,能用窄谱的就不用广谱的,能用一种xxx解决问题的就不用两种。
(六)基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程的区别与联系
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固定化酶的特点
酶类可粗分为xx酶和修饰酶,固定化酶属于修饰酶。在修饰酶中,除固定化酶外,还包括经过化学修饰的酶和用分子生物学方法在分子水平上进行改良的酶等。固定化酶的{zd0}特点是既具有生物催化剂的功能,又具有固相催化剂的特性。与xx酶相比,固定化酶具有下列优点:①可以多次使用,而且在多数情况下,酶的稳定性提高。如固定化的葡萄糖异构酶,可以在60~65℃条件下连续使用超过1000 h;固定化黄色短杆菌的延胡索酸酶用于生产L—苹果酸,连续反应一年,其活力仍保持不变。②反应后,酶与底物和产物易于分开,产物中无残留酶,易于纯化,产品质量高。③反应条件易于控制,可实现转化反应的连续和自动控制。④酶的利用效率高,单位酶催化的底物量增加,用酶量减少。⑤比水溶性酶更适合于多酶反应。
基因工程与疫苗
畜禽疫苗和疫病诊断试剂盒应用已成为保证现代畜牧业集约化、大规模生产的一个重要条件。随着核酸探针技术、单克隆抗体技术、基因工程技术的迅速发展,现已能大批生产高效、优质和多功能的畜禽疫苗,以及特异性强、灵敏度高和使用简便的诊断试剂盒,从而向控制和消灭畜禽疫病的目标迈出了一大步。
传统疫苗包括{dy}代、第二代疫苗,它们是由含减毒病毒和xx培养物,或者死亡的整个细胞、病毒或灭活毒素等制备而成。基因工程可应用于开发抵抗动物疾病(如狂犬病、口蹄疫、家禽瘟疫和xx感染等)的疫苗。DNA重组技术的发展已经能确定、克隆和表达抗原分子,从而可以方便地获得大量纯抗原分子,由此发展出使用抗原分子而不是整个生物体作疫苗,这种疫苗叫亚单位疫苗。
基因工程亚单位疫苗是用基因工程方法分离出病原的保护性抗原基因,将此基因转入原核或真核系统,使其表达出此病原的保护性抗原而制成的一类疫苗;或将病原的毒力相关基因删除掉或突变使其失去相关活性,使其成为不带毒力相关基因的基因缺失苗或突变苗。基因工程疫苗只含有病原的部分组成,而传统疫苗往往是完整的病原体,因此基因工程疫苗的{zd0}优点是安全性高。
基因工程亚单位疫苗最常采用的表达系统为大肠杆菌表达系统,例如预防幼畜腹泻的疫苗。但有时因为大肠杆菌系统表达的糖蛋白不能糖基化,导致免疫原性大大降低,这时比较理想的表达系统是酵母菌表达系统或昆虫细胞表达系统。
可用植物作生物反应器生产疫苗,利用植物生产疫苗的{zd0}优点是生产出的疫苗可以作为食品直接口服。目前该领域研究较深入的是利用转基因植物生产口服乙型肝炎疫苗。将乙肝表面抗原基因转入马铃薯并得到表达,用该转基因马铃薯喂养小鼠,在小鼠体内检测到保护性抗原,包括黏膜抗体,它们分泌到循环系统,能发挥正常功能。该实验证明,转基因植物中的抗原可安全通过动物消化道最终成为黏膜性抗原,不会被蛋白酶降解,而且只需口服少量的乙肝表面抗原蛋白就可产生良好的免疫应答反应。采用马铃薯只是为了研究工作方便,要使转基因植物成为真正的口服疫苗而应用,必须能在生食或只需简单加工的植物如蔬菜、水果中大量表达抗原蛋白。这样可以避免在食品加工过程中破坏抗原蛋白,如加热破坏抗原蛋白。