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引用 酶的研究与应用

2010-03-02 21:55:07 阅读9 评论0 字号:

 

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重点知识归纳及讲解

(一)果胶酶的作用

  果胶酶能够分解果胶,瓦解植物的细胞壁及胞间层,使榨取果汁变得更容易,而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,也使得浑浊的果汁变得澄清。

(二)温度和pH对果胶酶活性的影响

1、探究温度对果胶酶活性的影响

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2、探究pH对果胶酶活性的影响

  此实验设计只须将上一实验中的温度梯度改成pH梯度,并选定一个适宜的温度进行水浴加热即可。

  思考:

  (1)在探究温度或pH的影响时,是否需要设置对照?如果需要,应该怎样设置?

  需要设置对照实验,不同的温度梯度之间或不同的pH梯度之间就可以作为对照,即相互对照。

  (2)为什么能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低?

  果胶酶将果胶分解为小分子物质,小分子物质可以通过滤纸,因此苹果汁的体积大小反应了果胶酶的催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下,果胶酶的活性越大,苹果汁的体积就越大。

(三)果胶酶的用量

  有了前面的两个实验作基础,探究果胶酶的用量时,研究的变量是果胶酶的用量,其他因素保持不变。具体操作时,可以配制不同浓度的果胶酶溶液,也可以只配制一种浓度的果胶酶溶液,然后使用不同的体积即可。但要注意反应液的pH必须相同,否则将影响实验结果的准确性。

(四)加酶洗衣粉的洗涤原理

  碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹容易从衣物上脱落。碱性脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污能力。

(五)探究温度对加酶洗衣粉洗涤的影响

1、实验材料

  添加了复合酶的洗衣粉,大小相同的白棉布4块,并在上面分别滴加4滴同种的植物油,放置至干燥。

2、水温

  水温为5℃、15℃、25℃和35℃(其中5℃可以通过冰箱冷藏室控制,其他温度可以通过水浴控制)。

3、水质、水量

  水质为自来水,水量为500mL。

4、仪器

  1000mL的烧杯、玻璃棒等。

5、步骤

  (1)添加污物:取4块大小相同的白棉布,分别滴加4滴同种的植物油,放置至干燥。

  (2)控制水温,分别为5℃、15℃、25℃和35℃。水量为500mL,水质为自来水。(温度是变量)

  (3)加酶洗涤:加等量加酶洗衣粉洗涤。

  (4)记录结果:可根据洗涤前后油迹大小及颜色深浅的变化进行比较,并作记录。

6、结论

  加酶洗衣粉的洗涤效果受温度的影响,最适水温为X(代表实验得出的数据)。

(六)不同种类的洗衣粉对同一污渍或不同污渍洗涤效果的比较

1、说明

  在上一探究实验中,水温是变量,其它因素在实验中保持不变;而在本实验中,水温则应保持不变,变量是洗衣粉的类型或污物的类型。

2、实验设计(略)

  思考:普通洗衣粉和加酶洗衣粉的去污原理有何异同?

  相同点:表面活性剂可以产生泡沫,可以将油脂分子分散开;水软化剂可以分散污垢。

  不同点:酶可以将大分子有机物分解为小分子有机物,小分子有机物易于溶于水,从而与纤维分开。

(七)固定化酶和固定化细胞的作用和原理

1、固定化酶

  固定化酶是指限制在一定的空间范围内(如颗粒状的载体上等),可以反复使用的酶制剂。

  固定化酶的使用,使催化反应的产物中没有酶的残留,保证了产物的纯度,并且固定化酶可以反复使用,降低了生产成本。

2、固定化细胞

  固定化细胞多采用包埋法固定化,直接固定那些含有所需胞内酶的细胞来催化化学反应。

  固定化细胞固定的是一系列酶,可以将微生物的发酵过程变成连续的酶反应。

  思考:直接使用酶、使用固定化酶和使用固定化细胞催化反应,各有哪些优点与不足?

类型

优点

不足

直接使用酶

催化效率高,低耗能、低污染等。

对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。

固定化酶

酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。

一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。

固定化细胞

成本低,操作更容易。

固定后的细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。

(八)制备固定化酵母细胞

  仪器材料:烧杯、玻璃棒、天平、滴管、容量瓶、酒精灯、注射器;干酵母、固态CaCl2、固态海藻酸钠、蒸馏水。

  具体操作步骤如下:

1、酵母细胞的活化

  称取lg干酵母,放入50 mL的小烧杯中,加人蒸馏水10 mL,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右,使其活化。

2、配制物质的量浓度为0.05mo1/L的CaCl2溶液

  称取无水CaCl2 0.83g。放入200mL的烧杯中,加入150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。

3、配制海藻酸钠溶液

  称取0.7g海藻酸钠,放入50mL小烧杯中,加入10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至xx溶化,用蒸馏水定容至10 mL。注意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。

4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合

  将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的醉母细胞,进行充分搅拌,使其混台均匀,再转移至注射器中。

5、固定化酵母细胞

  以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右。

(九)用固定化酵母细胞发酵

1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。

2、将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25℃下发酵24h。

 

 

加酶洗衣粉

  加酶洗衣粉就是在合成洗衣粉中,加入0.2%~0.5%的酶制剂制成的。在洗衣粉中添加的酶的种类很多,如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶等。我国在洗衣粉中添加的酶最主要的是碱性蛋白酶。这种酶能耐碱性条件,而且耐贮存,对皮肤、衣物没有刺激和损伤作用。碱性蛋白酶能使蛋白质水解成可溶于水的多肽和氨基酸。衣物上附着的血渍、汗渍、奶渍、酱油渍等污物,都会在碱性蛋白酶的作用下,结构松弛、膨胀解体,稍加搓洗,污迹就会从衣物上脱落。

  使用加酶洗衣粉时必须注意以下几点:(1)碱性蛋白酶能使蛋白质水解,因此,蛋白质类纤维(羊毛、蚕丝等)织物就不能用加酶洗衣粉来洗涤,以免使纤维受到破坏;(2)使用加酶洗衣粉时,必须注意洗涤用水的温度。碱性蛋白酶在35~50℃时活性最强,在低温下或70℃以上就会失效;(3)加酶洗衣粉也不宜长期存放,存放时间过长会导致酶活力损失;(4)加酶洗衣粉不宜与三聚磷酸盐共存,否则酶的活性将会丧失;(5)添加了碱性蛋白酶的洗衣粉可以分解人体皮肤表面蛋白质,而使人患过敏性皮炎、湿疹等,因此,应避免与这类洗衣粉长时间地接触。

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