2月28日提要: 1. 配置3支空白对照试管,分别加入5ml2倍浓缩的培养基和5ml的无菌水。 2. 比较两台分光光度计的检测结果差异(在加完120支试管全部菌液以后视剩余菌液体积做) 3. 配置3种浓度(1MIC/0.5MIC/0.25MIC)的三种xxx溶液各50ml,3种浓度的硝普化钠各50ml。 4. 我们需要浓度是10^9的菌液120ml,需要在200ml的烧杯或者锥形瓶中配置。 5. 加入几种成分的顺序是先硝普化钠和xxx(这两个随便,菌液一定要{zh1}加)
具体任务:
1. 查看分光结果,确定三种xxx的MIC值 ,分光的标准是对照组的20%以下即为MIC(据书说是目测不浑浊) 具体判别的方式是如果E-TEST值的菌液浓度大于20%,则取20%以下的最小xxx浓度为信;如果有大于E-TEST值的xxx时的浓度明显小于20%,则取该大于E-TEST值。只有E-TEST值在20%左右或者可信值上下的值没有明显突变的时候,取E-TEST值(等待商榷)
2. 配置三种xxx的三种浓度的5倍浓缩溶液(上面2个谁先做完谁先做) 先配置100ml的1MIC的5倍浓缩溶液,其中50ml置于一个烧杯或锥形瓶作为1MIC试剂 然后取25ml的1MIC5倍浓缩溶液,加入有25ml无菌水的容器,作为0.5MIC的试剂 取15ml的1MIC5倍浓缩溶液,加入由45ml无菌水的容器,作为0.25MIC的试剂
3. 向120只试管加入xxx溶液,两个人做,与第四步同步
4. 配置浓度为10^9的菌液3个50ml(一个做{zh0}{zh1}做) 直接稀释25倍,分光,Y=26.959X+1.5821,3个重复每个稀释到50ml或更多。
5.配置硝普化钠溶液,一个人做也可以的 硝普化钠10倍浓缩液的浓度为10mmol/l,所需硝普化钠的质量是0.298g(有结晶水形式)。具体配制硝普化钠溶液的步骤为:使用xx电子天平称量所需药品的质量,倒入xx过的锥形瓶中,此锥形瓶中含有100ml的无菌水(已盖上纱布,之前已经xx),用xx后的玻璃棒搅拌,然后盖上纱布,即制得无菌的硝普化钠溶液。 1倍浓缩液(用于0.1mmol/L),就是在取10ml上述溶液加入到90ml无菌水中 0.1倍浓缩液(用于0.01mmol/L),取2ml10倍浓缩液溶液加入到198ml无菌水中(还是取10ml上面的溶液放到90ml水中?我觉得直接去2ml10倍的误差小些
6. 加样 2人操作,一人在后面监督,避免加样失误,先加完硝普化钠再加菌液 具体加样方式见处理.doc |