我是刚进入丁香园虚拟社区的新手,请大家多多帮助。由于课题需要做大鼠坐骨神经髓鞘锇酸染色后有髓神经纤维图象分析计数,不知什么地方能做?希望哪位战友能给予指点。谢谢!我的EMAIL是zw118zw@163.com
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锇酸染色是神经科学研究的一种常用而普遍的方法,它本来是用来固定脂质的,由于髓鞘的主要成分是脂质,所以用来借来用于有髓神经纤维的染色。锇酸染色方法比较简单,只要有锇酸原液,自己就可以进行!用于锇酸染色的浓度一般是1%,配制方法:用双蒸水配成2%的储存液,染色时用0.2M PB稀释成1%;(注意是PB而不是PBS,不含有NaCl,因为NaCl可以使锇酸沉淀;另外锇酸是一种强固定剂,所以配置的时候一定要通风,否则对你的嗅觉很有影响)方法:a)解剖镜下分离神经纤维,4%多聚固定b)切片(冰冻或石蜡)c)1%锇酸染色30min-60min或根据自己实际情况;d)光学显微镜(光镜)下观察;
锇酸染色是神经科学研究的一种常用而普遍的方法,它本来是用来固定脂质的,由于髓鞘的主要成分是脂质,所以用来借来用于有髓神经纤维的染色。
锇酸染色方法比较简单,只要有锇酸原液,自己就可以进行!
用于锇酸染色的浓度一般是1%,配制方法:
用双蒸水配成2%的储存液,染色时用0.2M PB稀释成1%;(注意是PB而不是PBS,不含有NaCl,因为NaCl可以使锇酸沉淀;另外锇酸是一种强固定剂,所以配置的时候一定要通风,否则对你的嗅觉很有影响)
方法:
a)解剖镜下分离神经纤维,4%多聚固定
b)切片(冰冻或石蜡)
c)1%锇酸染色30min-60min或根据自己实际情况;
d)光学显微镜(光镜)下观察;