许多药用植物的有效成分是次级代谢产物,人参的次级代谢产物人参皂苷的药效和人参根的药效相似,具有xxxxx,抗疲劳,降糖,降脂,,抗肿瘤,xx等的多种功效。 实验表明药用植物愈伤组织培养物中也含有药用活性成分,而细胞培养增殖速度比愈伤组织快得多。目前我国已有人参细胞培养生产药效成分产业化的例子。 发根农杆菌是一种革兰氏阴性土壤xx,能感染植物并产生毛状根。毛状根可以连续生产有用植物次级代谢产物,并且能保持基因的稳定性。这解决了细胞培养产量低和基因型不稳定的问题,因此本公司决定采用培养人参毛状根的方法来生产人参皂苷。 选择好的人参根,茎和叶子,用洗涤剂洗5~10分钟,xx,将其切成小段接种到含有土壤农杆菌的NB固体培养基中进行转染。然后,外植体转移到1/2MS培养基中培养2~3天,,{zh1}转移到含有300~500mk/l Claforan的半固体MS培养基中直到长处毛状根。诱导出的毛状根是否确为转基因产物还需鉴定。毛状根可以从形态水平上给于鉴定,它不依赖xx快速生长,根多丛生,多分枝,多根毛,无向地性。这些表型的特征与未转化的根不同,可区分开。可以通过毛状根中GUS活性的测定或NPTII酶的检测从组织水平来证明Ri质粒中的T-DNA是否转移整合到植物细胞的核因组上。 将人参毛状根用液体培养基,温度121°C,压力1.2kg/cm²条件下xx40~50min.空气进入反应器速率为0.1vvm.生物反应器在暗室温度为(23+2)°C下培养2~8个星期。
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