河南种猪场:猪细小病毒病诊断与预防(三)_河南省种猪场_新浪博客
 王川庆(1996)等利用对流免疫电泳技术检测PPV抗原和抗体,在pH8.6、离子浓度为0.1mol/L、电流4mA的条件下,1~2h便可得出结果,而且抗原和血清不需做特殊处理,使用的是普通电泳仪和常规试剂,因此有一定的推广价值,但是与HA或HI相比,其敏感度偏低。何启盖等(1999)将在IBRS-2细胞上同步培养增殖的PPV经甲醛灭活后,用经硫酸铵沉淀、透析浓缩后的病毒液致敏乳胶建立了检测PPV抗体的乳胶凝集试验诊断方法。致敏的乳胶抗原与PPV阳性血清反应出现肉眼可见的凝集颗粒,而且与生理盐水、PBS、犊牛血清、猪瘟、衣原体、口蹄疫、伪狂犬病、弓形虫病及萎缩性鼻炎等阳性血清不出现凝集现象。用LAT和HI同时对203份血清进行检测,结果发现二者的阳性符合率为93.16%。乳胶凝集试验与HI相比,具有简便、快速、经济等优点,尤其适合于临床上的现场检测,被许多学者誉为“傻瓜技术”,因此具有良好的推广应用前景。该方法的不足之处在于它所检测的抗体主要是IgM,因此只能用于疾病的定性诊断,不能进行血清抗体滴度的监测。Rivera等(1986)利用固相免疫荧光技术(IBA)检测PPV的抗原和抗体获得成功,其具有特异、敏感、快速、检出率高的特点,是实验室进行病毒分离鉴定常用的方法。
  单克隆抗体具有特异性强,效价高并可在体外大量制备等特点,已成功地用于许多疾病的诊断和xx。Men鄄geling等1984年就研制出PPV的McAb并用于临床诊断。国内俞太尉和丘惠深(1993)用PPV7909株免疫Balb/c小鼠,融合其脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞,筛选出4株分泌抗PPV单克隆抗体的杂交瘤细胞系(F1、E6、G9、D4),用D4株分泌的单克隆抗体建立的ELISA和HI同时对70份血清进行检测,阳性符合率为97.5%。但二者相比,因该ELISA具有从加样到结果判定均可自动化,不需对被检血清进行处理,样本容量大等特点而更适合于PPV病的早期诊断和流行病学调查。而核酸探针技术是一种分子水平的检测技术,具有快速、敏感、特异性强等特点,特别适用于疾病的早期诊断和类症鉴别诊断,是近二十年来应用较多的一项诊断技术。
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