康天仪表:酶标仪的检测原理_太原市康天仪表电子有限公司_百度空间
光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光, 400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。
  检测单位:
  光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
  检测单位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
  OD值由下述公式计算:
  E=OD=C×D×E
  C为检测物的浓度
  D为检测物的厚度
  E为摩尔因子
  在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波
长。
  但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了xx这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以xx这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以xx非特异性吸收。
  Anthos 酶标仪检测值计算
  仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,{zd0}为4095。仪器定义没有下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。透光值
的计算如下:
  T=(Meas—Min)/(Max—Min)
  其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:
  MaX=3600 Mn=20 Meas=30
  T=(30-20)/3600-20)=0.0028
  OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552
  Anthos 酶标仪的中心定位
  仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要xx酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
  的参照通道
  参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
  酶标仪的用途和其它提示
  用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。
  质量控制
  质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
  空白校正
  有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气,其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的,请按照试剂盒的  说明书要求进行。
  检测结果的解释
  由于有相当多的因素会影响检测的结果,如不同的酶标板,检测试剂的体积,都会造成OD值的不同,因此,  只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。


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