离子交换柱的清洗方式
根据
离子交换柱
污染物的情况,也可以采用DNA酶等其它的酶类。无论使用哪一种酶处理后,都要重复上述xx污染物的清洗步骤,把酶清洗干净。脂蛋白对分离介质的污染比较严重,因为脂蛋白及其它脂类物质,很容易粘附在层析柱内,{zh0}在进 行分离工艺前先将其去除。推荐使用硫酸葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮等沉淀剂,可去除高含量的脂蛋白。 对于物化结构非常稳定的介质,可用30℃~40℃的乙醇或丙酮进行洗脱或浸泡,在高温下可使吸附在介质上的蛋白变性或加快扩散速度,也有利于胶体物质的破坏,从而使污染物脱离介质。还可在乙醇或NaOH溶液中加入NaCl,更有利于介质的复苏。
使用有机溶剂后,
离子交换柱
要采用锯齿形的梯度洗涤进行清洗,即可以在5倍床体积内,使溶剂的含量从0增至{bfb},然后在下一个 5倍床体积中,使溶剂的含量从{bfb}降到0。如果经过上述处理,离子交换柱的工作情况仍没有恢复,可以使用蛋白水解酶,将仍滞留在介质内的蛋白 质进行水解,使其脱离介质。可以采用含有1mg/mL 胃蛋白酶的0.1mol/L 乙酸溶液及0.5 mol/L 的 NaCl 溶 液注入到交换柱中,在室温下浸泡过夜,或在37℃下浸泡一小时。
xx沉淀蛋白、脂类、疏水性的蛋白及脂蛋白,处理步骤更为复杂。可采用{bfb}的异丙醇、20%的乙腈、2mol/L的NaOH溶液、75%的乙酸、20%的乙醇、{bfb}的甲醇或6mol/L的盐酸胍、阳离子或非离子洗 涤剂等作为处理液。在用过这些清洗剂后,都要用至少2倍体积的蒸馏水进行清洗。
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