方法：实验选用清洁级、4周龄、雄性SD大鼠40只。取17只设为对照组：分为正常8周组和12周组：其余23只用链脲佐菌素(STZ)造模。注射STZ
72小时后测空腹血糖值>16.7
mmol为糖尿病模型，模型大鼠20只将其随机分为2组：模型8周、12周组，每组10只。分别于8周、12周后腹主动脉采血分离血清，测血清总胆固醇、低密度脂蛋白、糖化血清蛋白、醛固酮、内皮素-1。采用天狼星红染色法测心肌胶原含量，免疫组化测TGF-β1。多样本均数比较采用单因素方差分析，组间比较采用LSD检验，均由
Spss12.0软件完成
结果：最终进入结果分析35只。模型两组大鼠血糖水平均明显高于正常对照的两组（P<0.05）。实验8周、12周时，模型组大鼠心肌胶原表达明显高于正常对照组（P<0.05）。且模型12周组较8周组大鼠心肌胶原表达明显增加（P<0.05），实验8周、12周时模型组GSP﹑ET-1﹑醛固酮、总胆固醇﹑低密度脂蛋白及心肌TGF-β1水平均高于空白8周、12周组（P<0.05）。
试剂：链脲佐菌素、天狼猩红购自美国Sigma公司；转化生长因子1（TGF-β1）兔抗鼠一抗：购自美国Santa
Cruz公司；内皮素1（ET-1）ELISA试剂盒：购自上海森雄科技实业有限公司，进口分装；醛固酮（ALD）放免试剂盒：购自上海达为科生物科技有限公司，进口分装；糖化血清蛋白（GSP）、总胆固醇（T-CHO）、低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒:
均购自南京建成生物工程公司，国产；血糖试纸：德国罗氏公司。
1.2.1
动物分组及处理：雄性SD大鼠40只，随机取17只分为正常8周、12周对照组，8周组8只、12周组9只；正常饲养，不予特殊处理。其余23只SD大鼠禁食12小时后，按55mg／kg体重腹腔内注射浓度为1mg／mL的链脲佐菌素STZ
(用柠檬酸，柠檬酸钠缓冲液溶解配制，pH ：4.2)。注射STZ
72小时后用罗氏血糖仪测定大鼠尾尖空腹血糖，血糖值>16.7
mmol/l，动物多饮、多食及尿量增加者确定为糖尿病(DM) 模型，少数几个血糖升高但不合格者，按30
mg／kg体重腹腔内注射浓度为1mg／mL的STZ，72小时后再测定大鼠血糖，血糖值>16.7
mmol，有症状者纳入糖尿病大鼠分组，不合格者剔除。{zh1}有20只糖尿病造模成功者，将其随机分为2组：模型8周、12周组。每组10只。实验持续12周，实验每四周监测血糖一次。
注＃F＝22.412，
P<0.05
近年来随着我国人民生活水平的提高，饮食结构的改变，糖尿病的发病率持续上升。糖尿病及其并发症对人民的身体健康构成了严重的威胁。糖尿病心脑血管并发症是致死致残的主要原因。其中以糖尿病心肌病（DC）的危害性{zd0}[2]。因此,加强对DC的基础与临床研究具有重要的学术价值和社会效益。在DC的发病机制中，当前主要集中于高血糖引起心肌细胞凋亡和心脏细胞外基质的改变，这两方面是心肌增厚、舒张和收缩功能障碍的直接原因；其中，细胞外基质的改变主要是由于心脏胶原纤维增多所致，由此导致的心室壁僵硬度增加是导致心功能异常的重要原因之一[3]。Sunni等认为心肌间质胶原沉积的发生可能早于心肌细胞的增生、肥大。通过本实验发现，糖尿病大鼠在第8周时心肌组织中胶原含量明显增加，明显早于部分学人认为的糖尿病心肌胶原12出现沉积的时间段，提示糖尿病状态下伴随早期糖脂蛋白的代谢紊乱胶原即已经表达增强，并且从模型12周较8周组大鼠心肌胶原表达明显增多（P<0.05），说明随着糖尿病程的发展心肌胶原在间质的沉积表现为进行性成倍增长。当然此时也存在胶原类型所占比例的改变[4]。
现在认糖尿病者心肌病发生率高，经有效降低血糖水平后，可明显改善糖尿病心肌病变的预后，这与糖尿病程的发展心肌胶原在间质的沉积有关。糖尿病伴有循环和心脏局部ET，TGF-β1的xx，其中ET是最为重要的活性物质[5，6]。本实验也发现，糖尿病大鼠在病程第8
周时表现为循环ET-1水平的升高，随时间的变化糖尿病大鼠血清ET-1逐渐表现为下降态势，但仍然处于较高水平，ET-1不仅可促进心肌成纤维细胞分泌基质蛋白，还可促进成纤维细胞的合成和细胞数目的增加。ET-1的增加可促进TGF-β1、肿瘤坏死因子α(TNFα)、等多种细胞因子的表达，最重要的是TGF-β1。因此有研究认为内皮素引起心肌胶原沉积主要是通过TGF-β1增高所介导的[7],我们在本实验中观察到ET-1与TGF-β1的变化有正向关系，我们在本实验中发现醛固酮对糖尿病大鼠8周和12周时的心肌胶原表达呈现正相关，血管分泌的醛固酮引起胶原基因表达增强,胶原等蛋白合成增多,从而引起心血管重构[8]。因此，伴随糖、脂代谢异常引起内皮素、TGF-β1和醛固酮的增加可能是导致心肌间质胶原早期沉积的因素。
