人参皂苷Rh2 对免疫功能的影响

    摘 要:实验证明人参皂苷Rh2 在100-25mg/kg剂量下，可明显提高荷瘤小鼠的T、B淋巴细胞转化功能。显著促进溶血素的形成。增强巨噬细胞吞噬功能。此外试验还证明人参皂苷Rh2 可对抗因环磷酰胺所致骨髓造血功能抑制，提高氟脲嘧啶抑瘤率。对正常和荷瘤小鼠一般状况有改善作用。
    目 的:通过药效学实验，观察人参皂苷Rh2 对免疫功能的影响，为临床应用提供药理学依据。
    试验材料
    药 物:人参皂苷Rh2 内容物为类白色粉末，氟脲嘧啶为天津市氨基酸公司人民制药厂产品，批号为：980715。强力康冲剂为长春白求恩医科大学医药保健品有限公司产品，批号为：980908。注射用环磷酰胺为上海华联制药有限公司产品，批号为：971217。
    动 物： 昆明种小白鼠，体重18-22g，雌雄兼用，每批试验为一个性别。由吉林省中医中药研究院动物室提供，动物合格证号为 980101017 。
    一、人参皂苷Rh2 对荷瘤小鼠T、B淋巴细胞转化的影响
    取小鼠40只，接种Hep—A—22肝癌细胞后，将小鼠随机分为4组。每组10只。其中两组，分别灌喂人参皂苷Rh2 50和25mg/kg，阳性对照组，腹腔注射5—氟脲嘧啶（5—Fu） 25 mg/kg，正常对照组给予等体积生理盐水。每日1次，连续10日。末次给药后24小时，处死全动物。在无菌条件下取脾脏，制成单核细胞悬液（采用氯化铵破坏红细胞），将脾单核细胞稀释成1×10 6 个细胞悬液，分别加入ConA或LPS10mg/ml,混均后各取0.1 ml分别加入96孔板中，置入5%CO2 培养箱中，37℃培养72小时，每孔再加入1μCi3H—Tdr继续培养8小时，用多头细胞收集器收集细胞，经美产packard液闪仪记录[1] 。结果经t检验处理 （下同），结果见表1。

      结果表明:人参皂苷Rh2 可促进 ConA诱导淋巴细胞转化，特别是高剂量组。对LPS诱导淋巴细胞转化无明显影响。

    二、人参皂苷Rh2 对荷瘤小鼠溶血空斑形成的影响
    小鼠32只，接种Hep—A—22肝癌细胞后，随机分为4组，每组8只，给xx法和剂量同实验一，每日1次，连续10日。于给药第6日每只小鼠均腹腔注射制备好的绵羊红细胞（无菌条件下采绵羊静脉血，保存于阿氏液中，用时以PH7.2的PBS洗三次，每次1500r/min离心 15分，{zh1}用 PBS 配成20%浓度，即4×109/ml） 0.2ml,4 日后处死小鼠取脾脏，制单核细胞悬液调至1×10 6 / ml ，将0.7%琼脂1ml ，绵羊细胞0.1 ml和脾细胞0.1ml混均后置入制备好的平皿内铺平，37℃1小时，加补体每皿加豚鼠血2 ml ，37℃30分，室温30分，弃去补体，观察计数。结果以×10 6个脾细胞形成的空斑数表示（PFC）[2]。结果见表2。

结果表明:人参皂苷Rh2 高剂量可明显增加荷瘤小鼠溶血空斑形成。  

三、人参皂苷Rh2 对荷瘤小鼠碳粒廓清功能的影响
    取小鼠40只。接种S 180瘤株后，随机分为4组。按表3所示剂量分组给药。每日灌喂1次，连续 10 日。末次给药后 1 小时，各组小鼠均尾静脉注射稀释的 “一得阁” 墨汁 10ml/mg ，分别于2和15分钟后，眼眶采血0.05ml ，加入内含有0.01%Na 2 CO 3 溶液5ml 的试管中，摇均后于 752 型紫外分光光度计 650nm 处测试，并计算吞噬指数 K 值（ K=logod—logod/15—2）结果见表 3 。
    结果表明 : 用人参皂苷Rh2 可明显增强荷瘤小鼠对碳粒廓清能力，与对照组比较差异显著。

    四、人参皂苷Rh2 对正常小鼠耐疲劳、耐缺氧能力的影响
     1、耐疲劳，小鼠50只，随机分为5组，按表4所示剂量分组给药，每日灌喂1次，连续 10日，实验前饥饿16小时，末次给药后1小时，将小鼠置入水槽内（水温29±1℃，水深31厘米）记录小鼠游泳时间，结果见表 4。

   2、耐缺氧，取小鼠50只，随机分为5组。给xx法、剂量和给药时间同上，末次给药后1小时，将小鼠置入250ml 三角烧瓶内，密封后，记录小鼠存活时间。结果见表 4 。

    结果表明:人参皂苷Rh2 组小鼠游泳时间延长，缺氧条件下存活时间延长，与对照组比较差异显著。

    五、人参皂苷Rh2 对荷瘤小鼠耐疲劳、耐缺氧能力的影响

    1、耐疲劳：取小鼠50只。于接种S 180瘤株后，随机分为5组。给xx法、剂量、给药时间和试验方法同实验四项下的耐疲劳。结果见表 5 。
     2 、耐缺氧：取小鼠50只。于接种S 180瘤株后，随机分为5组。给xx法、剂量、给药时间和试验方法同实验四项下的耐缺氧。结果见表 5 。

    结果表明:人参皂苷Rh2 可提高S 180荷瘤小鼠耐疲劳、耐缺氧能力。

   六、人参皂苷Rh2 对荷瘤小鼠免疫器官和骨髓造血功能的影响
    取小鼠60只。接种S 180瘤株后，随机分为6组。按表 6所示剂量分组给药，每日灌喂 1次，连续15日。除正常对照组外，分别于给药第5、10日，同时ip注射用环磷酰胺1次，剂量为140 mg/kg[3] 。于末次给药后1小时，称体重后，经眼球眶内采血，测血白细胞和血小板数。取脾脏和胸腺，并计算脾指数和胸腺指数，剥离左侧股骨，用3%醋酸液10 mg冲洗骨腔，并计数全股骨骨髓内有核细胞总数。结果见表 6 。
    结果表明：灌喂人参皂苷Rh2 可使S 180荷瘤小鼠免疫器官指数提高，并可改善骨髓造血功能。

    七、人参皂苷Rh2 与氟脲嘧啶合用对小鼠肿瘤S 180的抑制作用
    取接种S 180肉瘤小鼠41只，随机分4组，按表7所示剂量分组和给药，每日灌喂1次，连续7日,末次给药后1小时，称小鼠体重后，拉颈致死，用扭力天平称瘤重，结果见表7。
    结果表明：氟脲嘧啶可以显著降低小鼠瘤重，抑瘤率为73.4%，人参皂苷Rh2 与氟脲嘧啶合用，能进一步降低小鼠瘤重，抑瘤率可达85.1%和83.0%，且与单用氟脲嘧啶组比较有显著性差异。
  结论：试验证明人参皂苷Rh2 可提高荷瘤小鼠T 、B淋巴细胞转化功能，增加溶血空斑形成，促巨噬细胞吞噬功能，说明人参皂苷Rh2 对荷瘤小鼠的免疫功能有促进作用。此外试验还证明，人参皂苷Rh2 可改善正常和荷瘤小鼠一般状况，可对抗环磷酰胺造成的骨髓造血功能抑制，与氟脲嘧啶联合使用可增加疗效。

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