可溶于清洗溶剂的残留物从色谱柱中去除- 烦之夏的日志- 网易博客
可溶于清洗溶剂的残留物从色谱柱中去除
2010-06-13 23:15:11
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用溶剂清洗毛细管色谱柱的方法,包括将要清洗的色谱柱从
GC
上卸下来,并将几毫升溶剂注入色谱柱中。
任何可溶于清洗溶剂的残留物就会从色谱柱中去除。如果未卸下色谱柱,就注入大量溶剂,将不能清洗色谱柱,也不能从色谱柱中去除任何污染物。毛细管
GC
色谱柱必须具有键合和交联的固定相才可以使用溶剂 进行清洗。若使用溶剂清洗非键合的固定相会严重损坏色谱柱。
可使用色谱柱清洗装置来将溶剂注入色谱柱中。溶剂清洗装置会连接到有压力的气源(
N2
或
He
),同时把色谱柱插入阿斗清洗装置中。把溶剂加入 到样品瓶中,
任何使用气源对溶剂瓶加压。 压力会强制溶剂流过色谱柱。残留物将溶解在溶剂中,并随溶剂反冲出色谱柱。然后将溶剂吹扫出色谱柱,并对色谱柱进 行适当的老化。
清洗色谱柱前,从色谱柱的前端敬爱能够其切去
0.5
米(即靠近进样器的一端)。将色谱柱连接检测器 的一端插入清洗装置中。通常使用多种溶剂来清洗色谱柱。后面继续使用的溶剂要必须要与前一种溶剂互溶。一定不要使用高沸点溶剂,特别是不要作为{zh1}使用的 溶剂。溶解样品的溶剂通常是不错的选择。
建议使用甲醇、二氯甲烷和己烷,它们在大多数情况下效果不错。可使用丙酮代替二氯甲烷,以避免使用含氯溶剂,但是,二氯甲烷是{zh0}的清洗溶剂之一。
如果测定的样品是水性的样品,如:生理体液和组织,则请在使用甲醇以前先使用水来冲洗。
某些来自于水性样品的残留物只能溶于水中而不溶于有机溶剂。应使用 水和醇类(如:甲醇、乙醇和异丙醇)来清洗键合的聚乙二醇基固定相(如:
DB-WAX
、
DB-WAXetr
、
B-FFAP
、
HP-Innowax
),但一般不建议采用该方法。
表中列出了针对各种直径的色谱柱,
建议使用的溶剂的体积。使用大量溶剂虽然无害,但效果不会好很多,并且还十分浪费。加入{dy}种溶剂 后,对清洗装置加压, 但要低于
20psi
。使用可 保持溶剂流速低于
1mL/min
的{zg}压力。除大多数
0.53mmm
内径的色谱柱外,在流速达到
1mL/min
之前清洗装置的压力将先到达
20psi
。如果使用的是比重较大或粘度较大的溶剂,或色谱柱直径小或长度大,则需要较长的清洗时间。待{dy}种溶剂全部进入或大部分已进入色 谱柱中后,加入下一种溶剂。待清洗的溶剂流出色谱柱后,让加压的气体通入色谱柱
5-10
分钟。
将色谱柱装入进样口然后通入载气。将载气通入色谱柱
5-10
分钟。把色谱柱连接到检测器上(或也可以根据个人意愿不接到检测器上)。使用程序 升温,从
40-50
℃开始将 色谱柱以
2-3
℃
/min
的升温速率,直至达到温度上限。将此温度保持
1-4
个小时,直至色谱柱xx老化为止。
原文地址:http://bbs.antpedia.com/viewthread.php?tid=28957
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