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离心机及转子的分类

2010-05-24 20:01:40 阅读8 评论1 字号：大中小

一．离心机的分类：国际上对离心机的分类方法有三种：按用途分、按转速分和按结构分。按用途分类：分为制备型离心机和制备分析离心机。制备型离心机：仅供分离浓缩，提纯试样的离心机。制备分析离心机：不但能分离浓缩、提纯试样，而且可以通过光学系统对试样的沉降过程进行观察、拍照、测量、数字输出、打印自动显示的离心机。按转速分类：分为低速离心机、高速离心机、超速离心机。低速离心机：转速在10000rpm以内或相对离心力在15000 ×g 以内。高速离心机：转速在10000∽30000rpm以内或相对离心力在15000∽70000 ×g以内。超速离心机：转速在30000rpm以上或相对离心力在70000 ×g以上。按结构分类：一般在高速和低速离心机根据结构和功能进行分类，品种繁多，各厂家命名也无统一标准。可分为台式离心机、多管微量台式离心机、细胞涂片离心机、血液洗涤台式离心机、高速冷冻离心机、大容量低速冷冻离心机、低速冷冻离心机、台式高速冷冻离心机、台式低速自动平衡离心机等。另外国外还有三联式（五联式）高速冷冻离心机，专作连续离心用。二．转子的分类应用及特点转子是离心机用于分离试样的核心部件，转子规格、品种的多少是衡量离心机生产技术掌握程度的重要标志，转子一般可分为下列五大类：固定角转子（Eixed-Angle-Rotor）：主要用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。颗粒在扇形溶地移动的距离很短，碰到外壁的颗粒沿着管壁滑到管底，形成沉淀，因此这种转子能很快地收集沉淀物。分离过程中，由于管壁的作用，在离心管内将会引起强烈的对流，对具有相同沉降速率的颗粒会产生不良影响。甩平转子（Siwing-Bucket-Rotor）：主要用于样品作密度梯度离心。颗粒移动距离长，溶液中的组分相对于管壁的位置在离心过程中和离心后不发生改变，因此离心效果好，但因颗粒在离心场中是从旋转中沿径向散离出去，而不是按相互平行的路线沉降。颗粒碰到外壁沿着管壁滑到管底，因此也会产生对流。（但比固定角转子小）低速时启动或停机时会产生振动，影响分离效果，甩平转子有敞开式和封闭式两种，一般制备容量大，转速小于10000RPM，离心力场在16000xg以内的，作成敞开式，主要用于样品的初分离。制备容量较前者小，转速大于10000RPM，离心力场在16000xg以上的，为了减少风力的影响，一般作成封闭式，主要用于线粒体、叶绿体、细胞核等的分离和密度梯度离心。连续离心转子（Continuous-Flow-Rotor）：主要用于悬浮介质中高速分离较小的颗粒物质，如在培养基中分离细胞，在运转过程中，悬浮样品以一定速度从转子体中心流入离心池，由于溶液中的组分轻重不同，在离心力场作用下，重粒子具有较大的惯性离心力、沉降快，当流速增大（降低）到一定值时，重粒子将留在离心池外缘底部，而介质将从出口流出并带走较轻的粒子，收集组分的方法是把组分冲洗出离心池或者留在转子体内，这种转子是利用离心淘析技术对整细胞或大的亚细胞粒子进行分离，在无菌和低温条件下，被分离的组分，能保持活性，回收率高等优点。如果液流方向与离心力方向相反，即降低了粒子运行速度，相当于增长了运行距离，从而提高了分辨能力。区带转子（Zonal-Rotor）：主要用于大容量的密度梯度离心，当实验所需制备的样品量多，而甩平转子因受到量的限制时，采用区带离心是较好的。主要由带有四块叶片的转子体和密封系统组成，转子体和四块叶片将离心池分为四个扇形小室，阻止溶液在离心池中旋转，叶片上有径向导管，溶液通过导管从中心流向转子体外壁，装样和取样时应小心，装样一般在2500∽3000rpm运转中进行，首先将梯度液中较轻的部分通过密封管道泵入转子内，由于惯性力的存在，梯度液在转子外壁的垂直方向形成均匀的一层，再依次将密度较高的梯度液泵入，随着密度的增高和梯度液的不断泵入，密度较低的梯度液被推向中心，直到转子xx装满，然后通过密封组件中心输液管把待分离的样品（其密度与梯度液中最轻的密度部分还低）加入，接着把密度更低的溶液注入，用以取代中心附近的样品，装完后，移去密封组件，盖上转子盖，在一定转速离心一定时间后，转速降至2500∽3000rpm，装上密封组件及输液管，通过泵入较密的液体到转子的液体由轻至重依次挤出。区带转子避免了用离心管所引起的壁效应（Walleffects）和干扰，提高了分辨率。垂直转子（Vertical-Tube-Rotor）：主要用于样品在短时间作密度梯度离心。甩平转子分离粒子位移距离长，分辨能力高，分离后组分的区带较宽，便于回收，但所需时间长，垂直转子分离的粒子位移距离等于离心管直径。转子转动前，管内密度梯度溶液的密度是沿重力方向变化，转动后，溶液的密度逐渐改变为离心力方向（水平方向）变化，离心结束后，溶液的密度变化方向因重力作用又沿铅垂方向变化，形成铅垂方向的密度梯度，由于离心管是垂直放置，所以溶液粒子位移的距离等于离心管的直径。离心时间短，离心后样品组分的区带较宽，但因离心时间短，粒子得不到充分分离，将会失去一些组分，又因区带与梯度介质的接触面大，易于扩散，停机后密度重新定向，易于混合，所以作区带离心的效果，垂直转子不于甩平转子。离心机转子的转速跟转子的材料和强度有关，一般采用强度好、重量轻的超硬铝合金（LC4），超速离心机采用钛合金（TiC4）。一般来说，对同一离心机重量轻、容量小的转子转速要高，反之转速要低。转子的保养及寿命管理在以后的章节中介绍。

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