XE-2100全自动血液分析仪操作规程(SOP)1_永殇无痕的空间_百度空间

1.    仪器简介

Sysmex公司的XE-2100全自动血液分析仪,每小时可检测150个样品,加网织红细胞的检测速度为每小时113个样本。XE-2100除常规检测功能外,还具有有核红细胞(NRBC)、网织红细胞(RET)、造血祖细胞(HPC)、未成熟粒细胞(IG)等的检测功能。XE-2100运用DIFF通道、WBC/BASO通道和MI通道三个专用通道和专用试剂用于白细胞的计数和分类及幼稚细胞的定量检测,使外周血中的异常细胞检测灵敏度高达1%,能有效避免早期白血病的漏检;同时排除了难溶红细胞、血小板聚集、巨大血小板及细胞碎片对白细胞计数的干扰,保证了白细胞计数的准确。另外XE-2100配备了两个血小板检测通道,电阻抗和荧光染色双方法检测血小板可有效排除常见的巨大血小板、血小板聚集、小红细胞、细胞碎片等的干扰,保证了正常血液样本和异常血液样本的结果都具有高度可靠性。

2.    分析原理

2.1RF/DC检测方法:

通过直流电阻的变化测定血细胞的大小,并通过射频电阻测定血细胞内的密度。一个血液样品经过吸液、定量、稀释为指定比,然后输送给相应的检测室。检测室内有一个称为“小孔”的圆孔,两侧均为电极。两个电极之间施以直流电和射频电流。稀释后样品中悬浮的血液细胞通过该孔,使两个电极之间的直流电阻和射频电阻发生变化。通过直流电阻的改变测定血细胞的体积大小,而射频电阻的变化检测血细胞内的密度(细胞核大小与其它信息),这种检测是以电脉冲的形式进行的。根据这些脉冲大小的不同,可得到血细胞大小和内部密度的二维分布(散点图)。通过对这些分布的检测,可得到各种测量数据。

2.2鞘流DC检测方法(RBCPLTHCT

在该检测器内,样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后,由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。

通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防止产生异常血细胞脉冲。

使用半导体激光器的流式细胞计数方法

使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。

一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比,并进行染色。然后将该样品送入流动池中。

这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时,由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。

一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收,侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。

前向散射光和侧向散射光

当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生光散射。XE-2100检测前向散射

光和侧向散射光,前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内部(如细胞核的体积大小)的信息。

侧向荧光

当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加,荧光强度也增加。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色的信息,XE-2100检测侧向荧光。

2.3SLS-血红蛋白测定法

在稀释的血液中加入溶血素,红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下,二价铁转变成三价铁,并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-HbSLS-Hb进入血红蛋白检测系统。测定SLS-Hb555nm波长下的吸光度值,并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。

2.4计算(红细胞指数)

红细胞指数(MCVMCHMCHC)通过RBC计数(RBC)、Hb浓度(HGB)和红细胞压积(HCT)的值计算出。计算公式如下:

MCVfl)= HCT×1015

       RBC/L

MCH (pg)   HGB(g/L)×1012

       RBC/L

MCHC(g/L) HGB(g/L)

       HCT



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